高压液相色谱主要类型及其分离原理

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高效液相色谱法主要类型及其分离原理概述如下：

高效液相色谱法主要分为以下几类：

1. 液-液分配色谱法和化学键合相色谱：流动相与固定相均为液体，两者互不相溶，通过试样在两相间的分配进行分离。流动相与固定相极性不同，固定液在流动相中可能有微量溶解，流动相通过色谱柱时的机械冲击力可能导致固定液流失。化学键合相色谱克服了这一问题，现在应用广泛。

2. 液-固色谱法：流动相为液体，固定相为吸附剂，利用物质的吸附作用实现分离。吸附作用机制为溶质分子与吸附剂表面活性中心的竞争吸附。

3. 离子交换色谱法：以离子交换剂为固定相，利用可逆的离子交换分离离子。阴离子交换剂的交换过程包括溶剂分子与树脂上可电离离子的交换，分离依据离子与交换剂的亲和力。

4. 离子对色谱法：在流动相或固定相中加入与溶质离子电荷相反的离子（反离子），形成疏水型离子对化合物，控制溶质离子的保留行为。

5. 离子色谱法：使用离子交换树脂为固定相，电解质溶液为流动相，通过电导检测器检测，消除流动相中强电解质的干扰。

6. 空间排阻色谱法：以凝胶为固定相，依据溶质分子大小进行分离。溶质通过色谱柱，大分子被排阻，小分子渗透到颗粒中，实现分离。

高效液相色谱仪包括进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统。进样系统保证进样量恒定，提高分析样品的重复性。输液系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪，可调整流动相的性质，实现有效分离。分离系统包括色谱柱、连接管和恒温器，实现高效分离。检测系统包括紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器，适用于不同类型的样品检测。数据处理系统对测试数据进行处理，支持样品的正确分析。

高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送（最高输送压力可达3.5万KPa）;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱（每米塔板数可达几万或几十万）；同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。