圆二色谱的数据要怎么分析得到各个结构的比例呢?
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发布时间：2024-10-23 22:43
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时间：2024-10-26 11:48
圆二色谱(简称CD)是一种广泛应用于研究蛋白质二级结构的快速、简便、准确的方法。它在溶液状态下进行测定，更接近蛋白质的生理状态，测定过程快捷，对构象变化反应灵敏，是当前研究蛋白质二级结构的主要手段之一。CD谱因其干扰少、易于测定，广泛用于测试手性小分子的绝对构型、大分子蛋白质和核酸的构象变化。
CD法测定大分子构型时，通常关注蛋白质、核酸和多糖的CD图谱分析。
蛋白质的圆二色谱一般分为两个波长范围：远紫外圆二色光谱和近紫外圆二色光谱。远紫外圆二色光谱区域（185～245 nm）反映了生物大分子主链的构象信息，α-螺旋结构在222nm、208nm处呈双负峰形，在190nm附近有一正峰；β-折叠在217-218nm处有一负峰，在195-198nm处有一强的正峰；无规卷曲构象在198nm附近有一负峰，在220nm附近有一小而宽的正峰。通过分析蛋白质的远紫外CD光谱（208和222 nm）处的负波峰增减，可以估计蛋白α-螺旋、β-折叠含量的变化。
近紫外圆二色光谱（245～320 nm）主要与侧链生色基团有关。如在250～260 nm为二硫键的吸收峰；在230～370nm为Trp、Tyr和Phe残基吸收峰。这一区域提供有关蛋白质二级结构的信息。
核酸的CD信号主要由不对称的主链上的核糖分子及螺旋结构产生。双螺旋结构（B构型最为常见）的CD谱在280nm有一个正峰，在245nm为一负峰。这一Cotton效应由堆积的碱基电子跃迁偶极矩的偶合产生。CD谱用于研究DNA/RNA构象的基础，可作为监测DNA/RNA结构改变的重要工具。
多糖类化合物的圆二色谱测定分成两种：200nm以下的真空圆二色谱，用于反映多糖的链接方式和空间构象；200nm以上的诱导圆二色谱，适用于含有π电子功能基的糖类，或者需进行多糖衍生化后测定。多糖CD谱的多样复杂性取决于生色基的种类、空间取向、糖苷键链接方式、多糖空间构象等因素。
