急!请问哪位大神知道测定植物apx酶活时,怎么测定酶液
发布网友
发布时间：2022-04-24 01:18
共1个回答
热心网友
时间：2023-10-17 22:47
1. 酶液制备 取1.0g植物叶片剪碎，按1∶3（W/V）加入预冷的50mmol/L K2HPO4-KH2PO4缓冲液进行研磨提取，用2层纱布过滤，滤液离心（4000×g）10min，上清液作酶粗提液供测定。
2. 酶活性测定 3ml反应混合液中含50mmol/L K2HPO4-KH2PO4缓冲液（pH7.0），0.1mmol/L EDTA-Na2，0.3mmol/L AsA，0.06mmol/L H2O2和0.1ml酶液。加入H2O2后立即在20℃下测定10～30秒内的A290变化，计算单位时间内AsA减少量及酶活性。追问就是算酶活的时候，不是需要知道其中蛋白质含量吗，我是想知道这个蛋白质该怎么测啊
热心网友
时间：2023-10-17 22:47
1. 酶液制备 取1.0g植物叶片剪碎，按1∶3（W/V）加入预冷的50mmol/L K2HPO4-KH2PO4缓冲液进行研磨提取，用2层纱布过滤，滤液离心（4000×g）10min，上清液作酶粗提液供测定。
2. 酶活性测定 3ml反应混合液中含50mmol/L K2HPO4-KH2PO4缓冲液（pH7.0），0.1mmol/L EDTA-Na2，0.3mmol/L AsA，0.06mmol/L H2O2和0.1ml酶液。加入H2O2后立即在20℃下测定10～30秒内的A290变化，计算单位时间内AsA减少量及酶活性。追问就是算酶活的时候，不是需要知道其中蛋白质含量吗，我是想知道这个蛋白质该怎么测啊
