发布网友 发布时间:2022-04-24 04:31
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热心网友 时间:2023-08-20 17:44
为什么s-100那条线 流速横坐标的时候再上 而样品体积横坐标的时候在下
根据我的理解,因为这两个测试分辨率的上样样品是不一样的,一个写的是混合蛋白的样品,一个写的是单纯的卵白蛋白。所以这两个测试图之间没什么关联。只能说明S-100在不同流速时对三个混合蛋白的分辨率高于S-300,而在不同上样体积时对卵白蛋白分辨率低于S-300。
这个填料的100、200、300指代什么
Sephacryl是一种合成柱料,是由烯丙基葡聚与N,N-甲叉二丙烯酰胺共价交联形成的高机械强度的疏水性填料,葡聚糖的组成比例决定了填料孔洞的不同。所以-100,-200,-300在不同的分子量范围时选择性不同,也就是分辨率不同。
具体来说,S-100适合分子量1000~10000的球蛋白。S-200适合分子量5000~25000的球蛋白,S-300适合分子量10000~1500000的球蛋白。追问1.如果都是卵白蛋白不用混合蛋白,那么不管是随流速变化还是体积变化,s-300都在上方么?混合蛋白三种成分分子量在10000以上,而s-100在上如何解释(适用1000-10000)?适用范围是样品各成分平均分子量嘛?2. 100、200、300这些数字是怎么来的呢?如果是定义的,为什么不1、2、3,是不是有一定含义的呢,G-25这个25就是吸水质量的10倍
感谢高手解答,谢谢老师!
追答1,如果都是卵白蛋白,缓冲液一致,不管是测试流速或者上样体积S-300的分辨率应该都是高于S-100的。
选择合适分子量范围并不是看最大的那个蛋白分子量是多少,而是看你想要的目的蛋白分子量是多少。凝胶过滤的目的是分离纯化蛋白,如果你的目的蛋白分子量在S-100的适用范围内,但样品组分内还有分子量高于S-100适用范围的杂蛋白,那么还是选择S-100去分离出你的目的蛋白。
2,100,200,300根据我查的资料,应该是以葡聚糖组成比例来区分的,至于为什么这么定义,这个还真是没查到。