细胞冻存的操作步骤
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热心网友
细胞冻存
1.预先配制冻存液：10 % DMSO + 90%胎牛血清，4℃冰箱保存预冷；
2.用胰酶对细胞进行消化：倒去培养瓶中的培养基或用*小心吸去培养板中的培养基，PBS冲洗两次，用胰酶消化细胞（尽可能温和）；
3.再次用完全培养液悬浮细胞，将预冷的冻存液加入消化完全的细胞中，用滴管轻轻吹打混匀。
4.在每支冻存管中加入1ml细胞液，密封后标记冻存细胞名称和冻存日期。
5.冻存步骤的细致直接关系到细胞复苏时的活力，如果有程序降温器（放在-80℃冰箱过夜，放入液氮罐）最好；或者可以在4℃，2h；然后转到-20℃，2h；-80℃，2h；放入液氮罐。
这是我实验中用的protocol，
希望能够帮到你~
热心网友
今天看师兄做的，跟上面那位说的好像有点出入：在加入胰酶消化，然后补充培养基后，师兄先是离心，然后去上清，然后冻存液重悬沉淀，没有再加培养基，然后4度30min，在-70度冷冻过夜
