pET28b能不能进行蓝白斑筛选
发布网友
发布时间：2022-04-22 09:03
共2个回答
热心网友
时间：2024-02-19 20:10
不能，因为没有lacZ的alph*段编码基因。
大多数表达载体为了高效表达目的蛋白，会避免插入其它不是必需的编码序列。
参考资料：http://ke.baidu.com/view/161221.htm
热心网友
时间：2024-02-19 20:11
百度百科曰：lacz'中包括：一段β-半乳糖苷酶的启动子；编码α肽链的区段；一个多克隆位点(MCS)。
为什么不能没lacz：1.MCS位于编码α肽链的区段中，是外源DNA的选择性插入位点。
2. 缺陷株基因组无法单独编码有活性的β-半乳糖苷酶。
不过当菌体中含有带lacz'的质粒后，质粒lacz'基因编码的α肽链和菌株基因组表达的N端缺陷的β-半乳糖苷酶突变体互补，具有与完整β-半乳糖苷酶相同的作用X-gal生成蓝色物质的能力，这种现象即α-互补。即，篮斑出现在含空质粒的菌里。重组质粒把lacz破坏了，就没有把xgal切成蓝色物质的能力了。
