发布网友 发布时间:2022-04-22 08:21
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热心网友 时间:2022-06-18 12:55
抑制基因表达的方法主要可以从三个水平上来进行
1:knock-out(基因敲除)。这是从基因组水平上进行的,基因内部插入一段较长的DNA序列,或是人为使基因的序列改变,采用的实验方法可以使用基因打靶或者是T-DNA插入。这些方法感兴趣可以自己去查一下,这里就不详细介绍了(打字很累。。)
2:就是你提到的RNAi,还有反义RNA技术,这是从RNA水平上进行的,主要是使目标基因的转录产物孤降解或者使其不能行使功能。采用的实验方法一般是构建好对应的干扰载体或反义载体,通过转基因方法导入目标体内,并产生能够抑制目标基因的转录物。
3:从蛋白水平上来进行沉默。例如你知道某个基因可以被A基因的产物所抑制或降解,那么你就可以将这个A基因通过转基因的方法转入生物体内让其表达,最终可以使目标基因的产物量达到很低以致于无法发挥功能
用于基因沉默的技术有很多,如果真的要达到一个全面掌握的水平,必须查阅相关文献
你说的那个病毒抑制基因表达的方法个人认为应该是构建病毒RNAi载体。。
热心网友 时间:2022-06-18 12:56
VIGS 病毒诱导的基因沉默。
原理都是一样的,只不过是利用病毒诱导的RNA干扰。病毒做为载体(插入你靶基因的片段)去侵染寄主,引起靶基因沉默。
热心网友 时间:2022-06-18 12:56
用病毒做的也是RNAi啊
在病毒载体当中克隆进shRNA对应的DNA序列或者长的RNA inverted reapeat的DNA序列,只要前面有RNA polymorease III的promoter比如U6,病毒整合到目标细胞的基因组里面之后就会表达出shRNA或者长的hairpin RNA,起到讲解目标mRNA的作用