1、 盐酸-镁粉反应
2、 样品溶于甲醇或乙醇,滴加几滴浓盐酸,加入少量镁粉或锌粉振摇或稍加热。黄酮、黄酮醇、二氢黄酮和二氢黄酮醇显橙红色~紫红色,少数显紫~蓝色;异黄酮、查耳酮、橙酮、儿茶素类为负反应。
3、 2、钠汞齐反应
4、 样品溶于乙醇,加入钠汞齐,放置或加热,过滤,滤液用盐酸酸化,则黄酮、二氢黄酮、异黄酮、二氢异黄酮显红色,黄酮醇显黄~淡红色,二氢酮醇显棕黄色。
5、 3、四氢硼钠(钾)反应
6、 样品溶于乙醇或甲醇中,加入等量的2%四氢硼钠的甲醇液,1min后再加浓盐酸或浓硫酸数滴,二氢黄酮类生成紫色~紫红色。
7、 4、锆盐-枸橼酸显色反应
8、 样品溶于甲醇,加入2%二氯氧锆(ZrOCl2)的甲醇液,若黄色则有3-OH或5-OH,再加入2%枸橼酸的甲醇溶液,黄色不退,则说明有3-OH,若黄色减退,加水稀释后甚至变为无色,则表示无3-OH,但有5-OH。
9、 5、醋酸镁显色反应
10、 样品乙醇溶液,滴于滤纸上,再滴上1%醋酸镁,紫外下观察,二氢黄酮、二氢黄酮醇类为天蓝色荧光,若有5-OH则色泽更明显,而黄酮、黄酮醇和异黄酮类等显黄~
橙黄~褐色。
11、 6、三氯化铝显色反应
12、 样品乙醇溶液,滴于滤纸上,再滴上1%三氯化铝,紫外下观察,应为鲜黄色荧光,但4`-羟基黄酮醇或7,4`-二羟基黄酮醇显天蓝色荧光。
13、 7、氨性氯化锶显色反应
14、 样品加甲醇溶解,加入0.01mol/L氯化锶(SrCl2)的甲醇溶液和被氨气饱和的甲醇溶液各3滴,如产生绿-棕色沉淀,则有黄酮有邻二酚羟基。
15、 8、五氯化锑反应
16、 查耳酮类的无水四氯化碳溶液与五氯化锑作用,生成红~紫红色沉淀。
17、 (1)盐酸一镁(或锌)粉试验:取检品的乙醇溶液1ml,加放少量镁粉(或锌粉),然后加浓盐酸4-5滴,置沸水浴中加热2-3分钟,如出现红色示有游离黄酮类或黄酮甙(以同法不加镁或粉做一对照,如两管都显红色则有花色素存在。如继续加碳酸试液使成碱笥即变成紫色双转变为蓝色,即证明含花色素)。
18、 黄酮类的乙醇溶液,在盐酸存在的情况下,能被镁粉还原,生成花色甙元而呈现红色或紫色反应(个别为淡黄色、橙色、紫色或蓝色)。这是由于酮类化合物分子中含有一个碱性氧原子,致能溶于稀酸中被还原成带四价的氧原子即锌盐。本法是鉴别黄酮类的一个反应。但花色素本身在酸性下(不需加镁粉)呈红色,应加以区别。
19、 【注】①此反庆仅在化学结构中,第三位上带羟基的酮醇类显色较明显,而其它黄酮烷酮类均不甚明显。因此试验呈阴性反庆是不能做出否定的结论,尚需结合其他实验再做结论。
20、 ②试验应在醇中进行,水分多会影响颜色的生成。此反庆较慢,有时需置水浴上加热,以促使反应的进行。
21、 (2)荧光试验:
22、 ①三氯化铝试验:取检品的乙醇溶液点于滤纸片上(干后再点1次,使其浓度庥中),干后,喷雾1%三氯化铝乙醇试液,在紫外光灯下观察,呈现黄色、绿色、橙色等荧光为黄酮类;呈现天蓝色或黄绿色;荧光,则为二氢黄酮类。这是区别二氢黄酮类化合物的一种鉴别反应。
23、 ②硼酸丙酮枸橼酸丙酮试验:取检品的乙醇溶液1ml,在沸水浴上蒸干加入饱和硼酸丙酮溶液及10%枸橼酸丙酮溶液各0.5ml,蒸去丙酮后,在紫外光灯下观察,管内呈现强烈的绿色荧光(黄酮或其甙类)。
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