全血水杨酸钠药物代谢动力学参数的测定
一、实验目的：
掌握药物代谢动力学参数的意义及其测定方法，掌握用分光光度法测定水杨酸钠（sodium salicylate）的血药浓度。
二、实验动物：
家兔 体重2.585kg 性别：雌
三、实验药品：
20%乌拉坦、 生理盐水、0.5%水杨酸钠、0.06%水杨酸钠标准液、10%三氯醋酸、10%三氯化铁、蒸馏水
水杨酸钠在酸性环境中成为水杨酸（salicylic acid），与三氯化铁生成一种紫色络合物。该络合物在520nm 波长下比色，其光密度与salicylic acid 浓度成正比。反应式为：
四、实验器材：
电子天平、兔台、5ml和1ml枪头、5ml注射器、6号针头、手术器械、动脉插管、棉球、头皮针、10ml离心管、722分光光度计、离心机、涡旋混匀器
五、实验方法
1、 取10支10ml试管，用0.5%肝素润湿管壁。
2、 家兔称重，从兔耳缘静脉注射20%乌拉坦（1g/kg体重，注射了13ml），待兔麻醉
后，将其仰卧，先后固定四肢及兔头(此时家兔惊醒，补助乌拉坦6ml)。
3、 剪去颈前部兔毛，正中切开皮肤5-6cm，用止血钳纵向分离软组织及颈部肌肉，暴
露器官及与气管平行的颈动脉。分离颈动脉，行颈动脉插管。手术完毕后，用温热的生理盐水纱布覆盖手术创口。静脉注射肝素，剂量为1000U/kg体重（约为2.58ml）。 4、 取1支10ml试管，家兔颈动脉取血1.5ml，摇匀试管内血液，防止凝血。
5、 沿对侧耳缘静脉缓慢注射10%水杨酸钠150mg/kg（因注射过程中发现部分药品漏
出，补注了一部分，估计约为3.9ml）。于注射后1、3、5、10、20、50、80、110min分别颈动脉放血1.5ml入相应的试管并摇匀。
6、 取10支10ml离心管，水杨酸注射前取血管子标为“对照”，水杨酸注射之后不同
时间取血管标为相应“取血时间”，另有1个管子没有取血，直接加入配置好的0.06%水杨酸钠标准液标为“标准”，按下表加入样品及试剂：
试管号 对照 10%三氯制酸（ml） 4 全血（ml） 1 0.06%水杨酸钠（ml） 0 蒸馏水（ml） 1 优质.参考.资料
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标准 各取血时间 4 4 1 1 1 0 0 1
六、注意事项
1.颈总动脉插管术。
2.取血前注意用肝素润湿注射器和针头，取血后注意用肝素封管，避免血液凝固。 3.注意取药时间的精准性。
4.注意先放掉残留在管中的液体后再放出的血才为该被收集的血液，不要误取了管中残留的血液和肝素等。
5.离心后不要用力摇晃细管避免沉淀物溶解。 6.每次加样时剂量一定要准确。
七、实验记录 采血时间 对照 标准 1 3 5 10 20 50 80 110 校零前实测数据 0.185 0.226 0.26 0.229 0.233 0.228 0.222 0.165 0.163 0.154 校零后数据 0 0.041 0.075 0.044 0.048 0.043 0.037 -0.020 -0.022 -0.031 计算所得药物浓度(mg/ml) 0 0.060 0.109 0.064 0.070 0.063 0.054 -0.029 -0.032 -0.045 7、 各试管用涡旋混匀器充分混匀，2000rpm，离心10min。 8、 各试管取上清液3ml加入另一套干净试管中，再加入10%三氯化铁0.3ml，混匀显
色。以对照管调零，再722分光光度计上读取520nm的OD值。 9、 求出水杨酸钠在家兔体内的血药浓度（Y）。先求出标准管浓度（Y0）与OD值（X0）
的比值（K），K=Y0/X0, Y=XK。
10、绘出药-时曲线，以水杨酸钠浓度的对数值为纵坐标，对应时间横坐标作图，分析 水杨酸钠药动力学模型及药动学参数计算。
八、数据分析：
因为后三组测量数据偏低，甚至低于对照组，导致计算所得的血药浓度变为负数，这明显是不现实的。因此在之后的软件分析中，将后三组血药浓度视为0进行分析（即舍弃后三组数据）。
分析时采用的程序为PKSolver Compartmental Analysis Report（Version 2.0 ），具体分析结果如下：
PKSolver Compartmental Analysis Report
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==== Version 2.0 ====
User Information Analyst: User Date: 2014-4-15 Time: 15:03:48
User Settings Time Unit: min Concentration Unit: mg/ml Dose: 390 Dose Unit: mg Number of compartment: 2 Fitting Weight: 1 Model PKSolver #206: Compartmental Analysis of Plasma Data after IV Bolus Input
Summary Table Time 1 3 5 10 20 Conc 0.6439 0.70244 0.62927 0.54146 ln(Conc) Conc_pre Residual -0.03658293 Weight 1 1 1 1 1 1.09256 0.088523566 1.09255235 7.64997E-06 -0.44021184 0.680482934 -0.35319529 0.663605943 0.038834057 -0.46319486 0.623329047 0.005940953 -0.61348608 0.54996059 -0.00850059 Calculation Results Parameter A Alpha B Beta mg/ml 1/min mg/ml 1/min Unit Value 36.30245325 4.521111854 0.706485351 0.012522792 Parameter k10 k12 k21 t1/2Alpha t1/2Beta C0 V CL V2 1/min 1/min 1/min min min mg/ml (mg)/(mg/ml) (mg)/(mg/ml)/min (mg)/(mg/ml) Unit Value 0.574267217 3.860777535 0.098589895 0.153313433 55.3508486 37.00893861 10.53799473 6.051624903 412.6675785 优质.参考.资料
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CL2 AUC 0-t AUC 0-inf AUMC MRT Vss (mg)/(mg/ml)/min mg/ml*min mg/ml*min mg/ml*min^2 min mg/(mg/ml) 40.68485331 20.52873111 64.44550121 4506.838365 69.932552 423.2055732 Diagnostics r obs-pre SS WSS R^2 WR^2 SE AIC SC Value 0.991984112 0.00295395 0.00295395 0.998941569 0.998941569 0.054350253 -21.1230601 -22.68530845
Charts Output
1.2Observed1PredictedConcentration (mg/ml)0.80.60.40.200510Time (min)152025
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10ObservedPredictedConcentration (mg/ml)10.10510Time (min)152025
分析：由于静脉给药，所以并没有表示药物在体内吸收分布的上升峰，图示
的是给药后血药浓度直接大幅上升，然后表现为持续较长时间的下降支，反映药物的代谢排泄相。由图及表格分析可知:
T=0时，C=0.109 T=20时，C=0.054
由于图示趋势线较精准，不正常点值少，故可以得出结论半衰期近似等于20min.
Residual Plot0.050.040.030.02Residual (mg/ml)0.010-0.01-0.02-0.03-0.04-0.05Time (min)0510152025
====================The End of PKSolver Report====================
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九、实验讨论：
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