非小细胞肺癌外周血T淋巴细胞活化抗原表达的临床研究

维普资讯 http://www.cqvip.com 中华结核和呼吸杂志２Ｏ０２年ｌｏ　筮箜鲞第ｌ０｛哩　ｉｎ　Ｔｕ　！　！　！　笪垫　！　量　・６３ｌ・　论著摘要　非小细胞肺癌外周血Ｔ淋巴细胞活化抗原表达的临床研究　陈清勇　王雪芬　周建英　ＨＬＡ．ＤＲ是人类主要组织相容性复合体（ＭＨＣ）Ⅱ类分子　Ⅲ期１６例，Ⅳ期１２例。正常对照组：健康献血者２５例，男　的主要抗原之一，ＣＤ２５是细胞膜上的白介素２受体（ＩＬ２Ｒ），　性ｌ６例，女性９例，年龄１８—４５岁，平均年龄（３６±２．５）岁。　ＣＤ６９是一种早期激活抗原，三者均为Ｔ淋巴细胞表面的细　方法：（１）标本采集：肺癌组术前、化疗前及术后、化疗１个疗　胞表型，其表达水平与肿瘤的关系已成为目前研究的热点。　程后采外周静脉血２　ｎｌｌ（肝素抗凝），健康献血者采外周静脉　我们进行了这方面研究，以期探讨肺癌患者的细胞免疫功能　血２　ｍｌ（肝素抗凝）。（２）试剂：鼠抗人单克隆抗体ＣＤ３．ＰＥ、　状态及临床意义。　ＣＤ２５．ＦＩＴＣ、ＨＬＡ－ＤＲ．ＦＩＴＣ和ＣＤ６９．ＦＩＴ（；及阴性对照羊抗鼠　对象与方法对象：肺癌患者５０例，均经手术病理和穿　ｌ＃７．－ｍ＇Ｃ均购于美国ＢＤ公司。（３）血液标本的处理：取静脉　刺活检证实。其中男性３３例，女性１７例。年龄３５　７６岁，　血２　ｍｌ，加淋巴细胞分离液２　ｎｌｌ，离心（１　５００　ｒ／ｍｉｎ，５　ｍｉｌ１），　平均（５ｏ．０±３．５）岁。进行手术的有２０例，化疗的有３０例。　提取其中淋巴细胞层，再以磷酸缓冲液（ＰＢＳ）２　ｍｌ漂洗，同　有淋巴结转移者３８例，无淋巴结转移者１２例。组织学分类　速离心３次，去上清后以７０％乙醇固定，备用。（４）免疫反应　及分级…：鳞癌３５例，腺癌１５例；高分化１０例，中分化２０　和流式细胞仪检测详见文献【３　】。统计学处理：用ＳＰＳＳ　９．０　例，低分化２０例。根据ＵＩＣＣ分期【　】：Ｉ期１０例，Ⅱ期１２例，　软件包进行统计学分析（ｔ检验）。　表１肺癌组治疗前后、对照组外周血ＣＤ３　／ＣＤ２５　、ＣＤ３　／ＨＬＡ－ＤＲ　和ＣＤ３　／ＣＤ６９　表达（牙±ｓ）　基金项目．ｍｉｘ省科技重点基金资助项目（Ｏｌ１１０３７１７）　作者单位：３１００１３杭州，解放军第一一七医院呼吸科（陈清勇）；浙江大学医学院附属第一医院呼吸内科（王雪芬、周建英）　维普资讯 http://www.cqvip.com ・６３２・　中华结核和呼吸杂志２ｏｏ２￣１０　旦箜箜鲞筮　塑　里　婴　塑　！！　！　！　垄！　：　结果　肺癌组治疗前后及对照组外周血ＣＤ３　／　ＣＤ２５＋、ＣＤ３＋／ＨＬＡ．ＤＲ　和ＣＤ３’／ＣＤ６９　的表达（表１）：肺癌　瘤的生长和转移；反之，患者免疫功能越低下，提示病期愈　晚，易发生转移，预后愈差。　一患者外周血中ＣＤ２５、ＨＬＡ．ＤＲ和ＣＤ６９在Ｔ淋巴细胞上的表　达明显低于正常对照组。手术后患者外周血中ＣＤ３　／　些研究表明。手术切除是减少癌负荷的快捷而有效　的治疗手段，肿瘤切除后肿瘤细胞所分泌的免疫抑制因子减　少，机体的免疫抑制状况得以改善【９］。本组２０例肺癌患者　经手术后外周血中ＣＤ３　／ＣＤ２５　、ＣＤ３　／ＨＬＡ－ＤＲ　和ＣＤ３　／　ＣＤ６９　的表达水平明显高于手术前，表明切除肿瘤确实有益　于改善细胞免疫功能，患者免疫功能的恢复，也为以后的放　疗和化疗创造了条件。肿瘤化疗的主要目的是直接杀伤肿　瘤细胞或诱导肿瘤细胞凋亡，但对机体免疫功能的影响，文　献报道不一【ｌｏＩ。３０例肺癌患者经化疗后外周血中ＣＤ３　／　ＣＤ２５＋、ＣＤ３＋／ＨＬＡ．ＤＲ　和ＣＤ３　／ＣＤ６９　的表达水平明显高　于手术前。化疗后外周血中ＣＤ３　／ＣＤ２５　、ＣＤ３　／ＨＬＡ－ＤＲ　和ＣＤ３＋／ＣＤ６９　的表达水平略高于化疗前，但差异无显著　性。　肺癌患者外周血中ＣＤ３　／ＣＤ２５　、ＣＤ３　／ＨＬＡ－ＤＲ　和　ＣＤ３　／ＣＤ６９　表达与临床参数的关系（表２）：随着肿瘤进展　和年龄的增高，肺癌外周血ＣＤ３　／ＣＤ２５　、ＣＤ３　／ＨＬＡ－ＤＲ　和ＣＤ３　／ＣＤ６９　的表达水平逐渐降低，Ｉ一Ⅱ期和Ⅲ一Ⅳ期　ＣＤ２５＋、ＣＤ３　／ＨＬＡ．ＤＲ　和ＣＤ３　／ＣＤ６９　的表达水平略高于　化疗前，但差异无显著性。说明化疗对机体免疫功能影响的　机制是较为复杂的，一方面化疗药物可抑制肿瘤细胞所分泌　病例之间。高、低年龄组之间其表达水平比较均有差异显著　性；肺癌伴淋巴结转移ＣＤ３　／ＣＤ２５　、ＣＤ３　／ＨＬＡ．ＤＲ　和　ＣＤ３　／ＣＤ６９　低于不伴淋巴结转移者；中高分化程度的肺癌　其ＣＤ３　／ＣＤ２５　、ＣＤ３　／ＨＬＡ．ＤＲ　、ＣＤ３　／ＣＤ６９　表达明显高　于低分化程度的肺癌。ＣＤ３　／ＣＤ２５　、ＣＤ３　／ＨＬＡ．ＤＲ　和　ＣＤ３　／ＣＤ６９　表达与鳞癌和腺癌及患者的性别没有相关性。　讨论恶性肿瘤的发生及其转移是受多因素调控的复　杂过程，其中细胞免疫功能低下，肿瘤细胞逃逸机体的免疫　监控起着十分重要的作用。ＩＬ－２Ｒ在细胞免疫功能的调节中　发挥着重要作用【　ｔ　，ＣＤ３　／ＨＬＡ．ＤＲ　的表达常被作为Ｔ细　胞活化的指标【４．　，ＣＤ６９是一种早期激活抗原，正常人群外　周血中ＣＤ６９在Ｔ淋巴细胞的表达常较高，提示机体处于免　疫高活化状态。肿瘤患者外周血中三个指标表达常较低，与　患者的病情进展密切相关【４　．８Ｊ。　的免疫抑制因子，另一方面又抑制了机体的细胞免疫功能，　确切的机制有待于扩大样本进一步研究。　通过研究，我们认为肿瘤患者存在着免疫功能低下，临　床上应加强免疫治疗。另外，检测肿瘤患者治疗前后的免疫　状态可间接提示病情和预后，也为临床肿瘤患者进行免疫治　疗提供了一定的理论依据。　参考文献　１刘复生，刘彤华，主编．肿瘤病理学．第２版．北京：北京医科大　学中国协和医科大学联合出版社，１９９７．３７１．３７２．　２　Ｍｏｕｎｔａｉｎ　ＣＦ．Ａ　ｎｅｗ　ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　ｓｔａ￣ｎｇ　ｓｙｓｔｅｍ　ｆｏｒ　ｌｕｎｇ　ｃａｎｃｅｒ．Ｃｈｅｓｔ。　１９８６。８９：５２２５－５２２８．　３周振英，吴晓柳，朱月清，等．恶性肿瘤患者外周血细胞ＣＤ２５表　达的临床意义．肿瘤防治研究，２００１，２８：１１７．１１８．　４　Ｙａｃｙ８ｌＩｙｌＩ　ＭＢ，Ｐｏｐｐｅｍａ　Ｓ，Ｂｅｒｇ　Ａ，ｅｔ　ａ１．ＣＤ６９　ａｎｄ　ＨＬＡ－ＤＢＡ　ａｅｔｉｖｉｏｎ　ａｎｔｉｇｅｎｓ　ｏｎ　ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ　ｂｌｏｏｄｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓｉｎｍｅｔａｓｔａｔｉｃ　ｂｒｅａｓｔ　ａｎｄ　ｏｖａｒｉａｎ　ｃａｎｃｅｒ　ｐａｔｉｅｎｔＳ：ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｓ　ｗｉｔｈ　ｓｕｒｖｉｖａｌ　ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ　本实验结果显示肺癌组外周血ＣＤ３　／ＣＤ２５　、ＣＤ３　／　ＨＬＡ．ＤＲ　和ＣＤ３　／ＣＤ６９　的表达水平明显低于正常对照组，　中高分化程度的肺癌患者其ＣＤ３　／ＣＤ２５　、ＣＤ３　／ＨＬＡ．ＤＲ　和ＣＤ３　／ＣＤ６９　表达明显高于低分化程度的肺癌；Ｉｌｌ—ＩＶ期　明显低于Ｉ一Ⅱ期，不同年龄组之间和有无淋巴结转移之间　其表达水平比较差异也有显著性。在病理类型和性别的研　究中，外周血ＣＤ３　／ＣＤ２５　、ＣＤ３　／ＨＬＡ．ＤＲ　和ＣＤ３　／ＣＤ６９　ａｃｔｉｖｅ　ｓｐｅｃｉｉｆｃ　ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ．Ｉｎｔ　Ｊ　Ｃｓ／ｉｃｅｒ，１９９５，６１：４７０－４７５．　５　Ｆｅｒｄｉｎａｎｄａ　Ｖ，Ｇｉａｃｉｎｔｏ　Ｔ。Ｍａｒｉａｄｉ　Ｇ，ｅｔ　ａ１．Ａｎａｌｙｓｉｓ　０ｆ　ｉｎｔｅｄｅｕｋｉｎ　２／　ｉｎｔｅｒｈｕｋｉｎ　２　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ｓｙｓｔｅｍ　ｉｎ　ａｄｖａｎｃｅｄ　ｎｏｎ－ｓｍａｌｌ　ｃｅｌｌ　ｌｕｎｇ　ｃａｌｔｃｅｒ．Ｔｕｍｏｒ，１９９８，２４：３３－３８．　６　Ｒｅｄｏｎｄｏ　Ｍ。Ｃｏｎｃｈａ　Ａ。Ｏｌｄｉｖｉｅｌａ　Ｒ，ｅｔ　ａ１．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＨＬＡ　ｃｌａｓｓＩ　ａｎｄ　ＨＬＡⅡｃｌａ∞ａｎｔｉｇｅｎｓ　ｉｎ　ｂｒｏｎｏｃｈｏ￣ｎｉｅ　ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ：ｉＳｔ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｔｏ　ｃｅｌｌｕｌａｒＤＮＡ　ｃｏｎｔｅｎｔａｎｄ　ｃｌｉｎｉｃｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｅｌｃ　ｐａｒａｍｅｔｅｍ．ＣａｎｃｅｒＲｅ＊，　１９９１，５１：４９４８－４９５４．　的表达水平无显著性差异。表明肺癌患者存在着细胞免疫　功能低下，可能是肺癌细胞产生一些免疫抑制因子，通过抑　制外周血中Ｔ淋巴细胞的活化功能如ＣＤ３　／ＣＤ２５　、ＣＤ３　／　ＨＬＡ・ＤＲ　和ＣＤ３　／ＣＤ６９　的表达水平来进一步抑制宿主的　７　Ｉｎｏｕｅ　Ｍ，Ｏｋｕｍｕｒａ　Ｍ，Ｆｕｊｉｉ　Ｙ，ｅｔ　ａ１．Ｉｍｍａｔｕｒｉｔｙ　０ｆｌｙｍｐｈｏｅｙｔ￣ｉｎ　ｔｈｅ　ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ　ｌｅｓｉｏｎｓ　０ｆｔｈｙｍｏｍａ．Ｃｌｌｎ　Ｉｍｍｕｎｏｌ　Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌ。１９９８，８８：　２４９－２５５．　免疫系统，使宿主免疫力下降，从而逃避机体免疫监视，呈现　不断生长发展的趋势。随着病情的发展，肿瘤恶性程度的增　高，患者的免疫功能由早期的活跃状态逐步发展到不同程度　的抑制；随着患者年龄的增高，其免疫功能也逐步下降。表　明患者的病情越晚，年龄越大，免疫状态越差，Ｔ淋巴细胞对　肿瘤抗原的识别能力下降，抗肿瘤免疫应答减弱，有利于肿　８王毅鑫，阮灿平，李莉，等．Ｔ细胞表面６种细胞表型的变化与大　肠癌分期及术式的关系．中国免疫学杂志，１９９８，１４：１０５．１０８．　９　ＮａｋａＴ￣ｋｉ　Ｈ．Ｐｌ￣．ｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｏｎ　ｅｙｔｏｋｉｎｅｓ　ｉｎ　ｐａｔｉｅｎｔＳ　ｗｉｔｈ　ｃａｎｃｅｒ．Ｃａｎｃｅｒ，１９９２，７０：７０９－７１３．　１０刘振华，主编．肿瘤预后学．第１版．北京：科学技术文献出版　社。１９９５．１９５．２０５．　（收稿日期：２００２－０３－２８）　（本文编辑：韩锟）