根据法律规定，聚众赌博的定罪规定是行为人以营利为目的，聚众赌博或者以赌博为业的行为。该罪的关键是在主观上要求行为人是故意，且以营利为目的或以赌博为业的情形。
《刑法》第十四条 明知自己的行为会发生危害社会的结果，并且希望或者放任这种结果发生，因而构成犯罪的，是故意犯罪。 故意犯罪，应当负刑事责任。 第三百零三条 以营利为目的，聚众赌博或者以赌博为业的，处三年以下有期徒刑、拘役或者管制，并处罚金。 开设赌场的，处三年以下有期徒刑、拘役或者管制，并处罚金；情节严重的，处三年以上十年以下有期徒刑，并处罚金。
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