复合动物蛋白酶水解蛋清蛋白最优工艺的研究

２０１０年第６期　总第３５卷　中国调味品　ＣＨＩＮＡ　Ｃ０ＮＤＩＭＥＮＴ　试验研究　复合动物蛋白酶水解蛋清蛋白最优工艺的研究　刘晓艳　，于纯淼　，张妍　，曾凤彩　（１．黑龙江中医药大学，哈尔滨　１５００４０；２．黑龙江旅游职业技术学院，哈尔滨　１５００８６；　３．齐齐哈尔大学，黑龙江齐齐哈尔　１６１００６）　摘要：生物活性肽具有免疫调节、激素调节、酶抑制、抗茵等多种生理功能。文章研究以蛋清为原料，采　用复合动物蛋白酶水解制备蛋清活性肽。通过单因素实验及Ｌ　（４　）正交实验对制备蛋清活性肽的可　控酶解条件进行了优化。实验结果表明，复合动物蛋白酶最适水解条件为：ｐＨ　７．５，水解温度５５℃，底　物浓度３％，酶浓度４　，水解时间６　ｈ。　关键词：鸡蛋蛋清蛋白；蛋白酶；水解；多肽；水解度　中图分类号：ＴＳ２０１．２５　文献标识码：Ｂ　文章编号：１００Ｏ一９９７３（２０１０）０６—００６２－－０４　Ｏｐｔｉｍｕｍ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｆｏｒ　ｐｒｏｔａｍｅｘ　ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｅｇｇ　ｗｈｉｔｅ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ＬＩＵ　Ｘｉａｏ—ｙａｎ　，ＹＵ　Ｃｈｕｎ—ｍｉａｏ　，ＺＨＡＮＧ　Ｙａｎ　，ＺＥＮＧ　Ｆｅｎｇ－ｃａｉ。　（１．Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ。Ｈａｒｂｉｎ　１５００４０，Ｃｈｉｎａ；　２．Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ　Ｔｏｕｒｉｓｍ　Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｈａｒｂｉｎ　１５００８６，Ｃｈｉｎａ；　３．Ｑｉｑｉｈａｅｒ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｑｉｑｉｈａｅｒ　１６１００６，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｂｉｏａｃｔｉｖｅ　ｐｅｐｔｉｄｅｓ　ｈａｖｅ　ｉｍｍｕｎｅ　ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ，ｈｏｒｍｏｎａｌ　ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ，ｅｎｚｙｍｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ，ａｎｔｉｂａｃ—　ｔｅｒｉａｌ　ａｎｄ　ｏｔｈｅｒ　ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａ１　ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ．Ｅｇｇ　ｗｈｉｔｅ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ａｓ　ｒａｗ　ｍａｔｅｒｉａｌ　ｔｏ　ｐｒｅｐａｒｅ　ｂｉｏａｅｔｉｖｅ　ｐｅｐ－　ｔｉｄｅ．Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｐＨ，ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ　ｔｉｍｅ，ｓｕｂｓｔｒａｔｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｅｎｚｙｍｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａ—　ｔｉｏｎ　ｏｎ　ＤＨ　ｗｅｒｅ　ｓｔｕｄｉｅｄ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ，ｔｈｅ　Ｌ１６（４。）ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｗａｓ　ｄｅｓｉｇｎｅｄ　ｔｏ　ｏｂｔａｉｎ　ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ｆｏｒ　ｐｒｅｐａｒｉｎｇ　ｂｉｏａｃｔｉｖｅ　ｐｅｐｔｉｄｅ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｐｒｏｔａｍｅｘ　ｗｅｒｅ　ｐＨ　７．５，５５℃，ｓｕｂｓｔｒａｔｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　３　，ｅｎｚｙｍｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　４％，６　ｈ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｅｇｇ　ｗｈｉｔｅ；ｐｒｏｔａｍｅｘ；ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ；ｐｅｐｔｉｄｅ；ｄｅｇｒｅｅ　ｏｆ　ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ　我国有世界上最为丰富的禽蛋资源，禽蛋产量　１９８５年以来一直居世界第一位，但精深加工量不足禽　易凝固，极大地限制了它在食品加工中的利用。　生物活性肽具有免疫调节、激素调节、酶抑制、抗　蛋产量的２　，鸡蛋的营养价值和功能特性并没有得　到充分的开发利用。鸡蛋蛋清是一种胶体物质，它的　分散介质为水，分散相为蛋白质。蛋清中的蛋白质含　量约占１１　～１５　，这其中主要包括卵清蛋白、卵转　铁蛋白、溶菌酶、卵粘蛋白、类卵粘蛋白、卵球蛋白和抗　生物素蛋白等。蛋清蛋白含有人体所必需的多种氨基　菌以及安神镇痛等多种生理功能　］。蛋类作为食物蛋　白质的重要来源之一，为生物活性肽的开发提供了良　好的原料。将蛋清进行酶解生产蛋清肽使产品具有低　渗性、低致敏性、高稳定性和高的溶解性，同时，也能获　得具有生物活性的寡肽。金嫘等报道［３］，鸡蛋蛋清经　Ａｌｃａｌａｓｅ碱性蛋白酶酶解后的小肽混合物均具有清除　活性氧和抗脂质氧化的能力；杨万根等报道　］，Ａｌｃａ－　酸，且氨基酸组成配比均衡性好，是机体利用率最高的　一类蛋白质［１］。鸡蛋中蛋清蛋白质对热不稳定，加热　ｌａｓｅ　２．４Ｌ碱性蛋白酶和Ｐｒｏｔｅａｓｅ　Ｎ蛋白酶酶解物具　收稿日期：２０１０－－０１—１８　基金项目：黑龙江省科技厅攻关研究资助项目（ＧＡ０７Ｂ４０１—２）；黑龙江省教育厅资助项目（１１５３１３５５）　作者简介：刘晓艳（１９６２一），女，副教授，主要从事农产品深加工工作。　一６２—　２０１０年第６期　总第３５卷　ＣＨＩＮＡ　ＣｏＮＤＩＭＥＮＴ　中国调味品　试验研究　有抗氧化和抗凝血酶活性。刘静波等［５　报道，蛋清蛋　白经碱性蛋白酶和风味蛋白酶双酶水解制备蛋清高Ｆ　值寡肽。２００４年，Ｍｉｇｕｅｌ等［６　］研究了几种蛋白酶对　加入量和时间。在单因素实验的基础上，采用正交实　验设计研究酶解温度、ｐＨ值、底物浓度、加酶量５个　因素对水解度的影响。　蛋清的水解效果，其中，胃蛋白酶水解产物具有较高的　ＡＣＥＩ活性（ＩＣ５０＝５５．３　ｐｇ／ｍＬ）。本实验研究使用复　合动物蛋白酶将鸡全蛋清蛋白水解的最优工艺条件，　为蛋清蛋白在功能食品以及医药保健品领域的开发利　２　结果与分析　２．１　ｐＨ值对蛋清蛋白水解效果的影响　复合动物蛋白酶适宜ｐＨ值范围为６～９，因此选　用开辟新的途径。　１　材料与方法　１．１材料与仪器　鸡蛋购自齐齐哈尔市大润发超市；复合动物蛋　白酶（酶活力，１４６５１１　Ｕ／ｇ）　南宁庞博生物技术有限　公司；其余试剂均为分析纯。　ＵＶ７５７ＣＲＴ紫外可见分光光度计、７２２可见分光　光度计上海精密科学仪器有限公司；ＢＳ１２４Ｓ电子天　平北京赛多利斯仪器系统有限公司；ＴＤＬ－５一Ａ型低　速台式离心机　上海安亭科学仪器厂；ＤＦ－Ⅱ集热式　磁力加热搅拌器　江苏省金坛市医疗仪器厂；ＳＨＺ　Ｂ　水浴恒温震荡器　上海跃进医疗器械厂。　１．２实验方法　１．２．１检测方法　蛋白酶活力测定法——福林法［ｇ］。　水解度测定法——茚三酮比色法［１。。。　ｌ＿２．２实验方法　１．２．２．１工艺流程　新鲜鸡蛋一搅打一调配一热处理一加酶一酶解一　灭酶。　１．２．２．２酶解蛋清制备活性肽的方法　将鸡蛋洗净，打蛋后分离蛋清，取一定质量的蛋清　用水稀释到一定浓度，用２　ｍｏｌ／Ｌ　ＮａＯＨ溶液调ｐＨ　为１Ｏ，８５℃水浴静置３０　ｍｉｎ使之变性。加酸　（２　ｍｏｌ／Ｌ　ＨＣ１）或碱（２　ｍｏｌ／Ｌ　ＮａＯＨ）调至水解预定　的ｐＨ值，加入一定量的复合动物蛋白酶进行水解，水　解时间为所设计时间。水解过程中采用恒温磁力搅拌　器不断地搅拌蛋清溶液，并不断加入适当浓度的　ＮａＯＨ以维持ｐＨ值恒定，记录耗碱量。水解结束后　将水解物置于沸水浴内灭酶１０　ｍｉｎ，然后水解物　５　０００　ｒ／ｍｉｎ下离心１０　ｍｉｎ，测定上清液水解度。　１．２．２．３酶解条件的优化　以水解度（ＤＨ）作为实验的衡量指标，采用单因　素实验依次确定酶解的ｐＨ值、温度、底物浓度、酶的　择此范围作为单因素实验的主要考察范围。ｐＨ值对　蛋清蛋白水解度的影响如图１所示。由图１可见，当　ｐＨ值在６．Ｏ～９．０时，碱性蛋白酶的水解度随着ｐＨ　值的增加逐渐增大。当ｐＨ值为７．０时，水解度出现　最高点，而后水解度逐渐降低。因此酶解ｐＨ值７．０　为宜。　ｌ４　ｌ２　一ｌＯ　８　吞６４　　２　０　５　图１　ｐＨ值对蛋清蛋白水解效果的影响　注：酶解条件Ｔ一５０℃，Ｅｓ３—４％，ＥＥ３／ＥＳ￣一１　。　２．２温度对蛋清蛋白水解效果的影响　复合动物蛋白酶适宜温度范围为４０￣６０℃，因此　选取４５￣６０℃作为主要实验范围。温度对蛋清蛋白　水解度的影响如图２所示。由图２可见，酶解温度在　４Ｏ～５０℃范围内时，水解度随着温度的增加逐渐增　大，酶解温度为５０℃时，水解度最高，达到９．６９　，酶　解温度再升高，水解度逐渐降低。因此水解温度５Ｏ℃　为宜。　１　１　＾　一　墨　口　图２温度对蛋清蛋白水解效果的影响　注：酶解条件Ｔ一５０℃，Ｅｓｌ一４％，ＥＥ］／ＥＳ３＝１％。　２．３底物浓度对蛋清蛋白水解效果的影响　不同底物浓度对蛋清蛋白的水解度的影响如图３　所示。由图３可见，当底物浓度在２．０　９，５～４．０　时，　一６３—　２０１０年第６期　总第３５卷　ＣＨＩＮＡ　ＣＯＮＤ　ＥＮＴ　中国调味品　试验研究　水解度随着底物的加入量增加逐渐增大，当底物浓度　时，水解度变化趋势逐渐趋于平缓，最终基本上保持不　在４．０　时出现转折点，此后水解度随底物浓度的加　变。由图５可见，当水解时间达到６　ｈ时，水解度达到　入量增加趋于平缓。　底物浓厦（％）　图３底物浓度对蛋清蛋白水解效果的影响　注：酶解条件ｐＨ　７．０，Ｔ一５０℃，［Ｅ］／ＥＳ］＝１　。　２．４　ＥＥ］／［Ｓ］对蛋清蛋白的水解度的影响　ＥＥ－１／￣Ｓ－Ｉ对蛋清蛋白的水解度的影响如图４所　示。由图４可见，当加酶量在１．０　～２．ｏ　Ａ时，水解　ｏ度随着蛋白酶的加入量的增加而急剧增大，当加酶量　在２．０　时出现转折点，此后水解度随蛋白酶的加入　量增加趋于平缓。　∞　［Ｅ］／［Ｓ］（％）　图４　［Ｅ］／［Ｓ］对蛋清聋白的水解度的影响　注：酶解条件ｐＨ　７．０，Ｔ＝５０℃，Ｅｓ］＝４％。　２．５酶解时间对蛋清蛋白水解效果的影响　酶解时间对蛋清蛋白水解度的影响如图５所示。　图５随解时间对蛋清蛋白水解效果的影响　注；酶解条件ｐＨ　７．０，Ｔ＝５０℃，Ｉｓ］＝４％，［Ｅ］／［Ｓ］＝１％。　蛋清蛋白与蛋白酶进行水解时，随着水解时间的　增加，水解度逐渐增大。当水解时间增大到一定程度　一６４一　最大，为１２．２１　，此后，随着水解时间的延长水解度　略有降低，因此选择水解时间为６　ｈ为宜。　２．６正交实验确定酶水解蛋清蛋白的最佳工艺条件　为确定复合动物蛋白酶水解蛋清液最佳工艺参　数，在单因素实验的基础上，选取５个因素，以水解度　为考察指标，采用Ｌ　（４。）正交实验表，实验结果见表　１。　表１复合动物蛋白酶水解聋清蛋白影响因素正交实验结果　实验号　Ｈ　３．５４　１．４４　９．２８　２１．５９　７．３９　５．４８　２．９５　７．８Ｏ　５．２８　９．９７　７．６４　０　：０　０　０　ｌ２．０５　ｌ２．３５　１６．３８　６．６４　５．３３　Ｋ１　８．０８　７．９８　ｌ３．００　５．２１　４．１８　Ｋ２　８．９５　７．１０　６．８６　６．９２　７．８６　Ｋ３　７．２２　１Ｏ．７０　８．４６　１０．１０　１２．５２　ｌ１．６８　１Ｏ．１５　７．６１　１３．７Ｏ　ｌ１．３７　Ｒ　３．６０　２．１８　５．３９　８．４９　８．３４　由表１可知，复合动物蛋白酶酶解蛋清蛋白水解　度的主要影响因素的大小依次为：Ｄ＞Ｅ＞Ｃ＞Ａ＞Ｂ，　即加酶量＞时间＞底物浓度＞ｐＨ值＞温度。复合动　物蛋白酶水解蛋清的最佳工艺条件为：ｐＨ　７．５，水解　温度５５℃，底物浓度３　９／６，酶浓度４　，水解时间６　ｈ。　３　结论　复合动物蛋白酶水解蛋清蛋白质是可行的。实验　确定了以水解度为指标，复合动物蛋白酶水解鸡蛋白　蛋白的最佳工艺条件为：ｐＨ为７．５、温度为５５℃、　［ｓ］９，６—３　、［Ｅ］／ＥＳ］一４　９，６、ｔ－－６　ｈ，ＤＨ达２１．５９　。　参考文献：　［１］张兰威，牟光庆，许高升．蛋制品工艺学［Ｍ］．黑龙江科学技　术出版社，１９９６：６－１９．　［２］郑建仙．功能食品［Ｍ］．北京：中国轻工业出版社，１９９５：３４７．　∞　２０１０年第６期　总第３５卷　ＣＨｌＮＡ　ＣＯＮＤＩＭＥＮＴ　中国调味品　试验研究　［３］金嫘，王晶，李新华．Ａｌｅａｌａｓｅ碱性蛋白酶酶解蛋清制备抗氧　化活性肽［Ｊ］．食品研究与开发，２００９，３０（６）：５９—６２．　［４］杨万根．蛋清蛋白水解物的制备、结构及其生物活性的研　究［Ｄ］．无锡：江南大学，２００８．　［７］ＭＩＧＵＥＬ　Ｍ，ＡＬＯＮＳＯ　Ｍ　Ｊ，ＳＡＬＡＩＣＥＳ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ａｎｔｉｈｙ－　ｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅ，ＡＣＥ—ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ａｎｄ　ｖａｓｏｄｉｌａｔｏｒ　ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ　ｏｆ　ａｎ　ｅｇｇ　ｗｈｉｔｅ　ｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅ：Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ａ　ｓｉｍｕｌａｔｅｄ　ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ　ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｆｏｏｄ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００７，１０４（１）：１６３—１６８．　［８］ＭＩＧＵＥＬＭ．ＬＯＰＥＺ－ＦＡＮＤ１０Ｒ。ＲＡＭ０ＳＭ，ｅｔａ１．Ｌｏｎｇｔｅｒｍ　ａｎｔｉｈｙ—ｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｅｇｇ　ｗｈｉｔｅ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｐｅｐｓｉｎ　ｉｎ　［５］刘静波，林松毅，张铁华，等．蛋清高Ｆ值寡肽可控酶解条件　的筛选［Ｊ］．沈阳农业大学学报，２００７，３８（２）：１７４—１７７．　［６］ＭＩＧＵＥＬＭ。ＲＡＭＯＳＭ，ＡＬＥＩＸＡＮＤＲＥＭＡ，ｅｔ　ａ１．Ｅｆｆｅｃｔｏｆ　ｓｉｍｕ—ｌａｔｅｄ　ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ　ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ　ｏｎ　ｔｈｅ　ａｎｔｉｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅ　ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ　ｏｆ　ＡＣＥ－ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｐｅｐｔｉｄｅｓ　ｄｅｒｉｖｅｄ　ｆｒｏｍ　ｏｖａｌｂｕ－　ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅ　ｒａｔｓＤ］．　ｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００６，７８（２５）：２９６０－２９６６．　［９］全国食品工业标准化技术委员会．ＳＢ／Ｔ１０３１７—１９９９蛋白　质酶活力的测定［Ｓ］．北京：中国标准出版社，１９９９．　ｍｉｎＤ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　ａｎｄ　Ｆｏｏｄ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００６，　５４（３）：７２６—７３１．　［１Ｏ］赵新淮，冯志彪．蛋白质水解物水解度的测定［Ｊ］．食品科　学，１９９４，７９（１１）：６５－６７．　（上接第５９页）同，并没有因为微波的照射而破坏其主　要成分。更为重要的是，在蒸馏过程中，不需要添加任　何溶剂，完全可以利用植物自身内部所含的水分实现　循环，是一种完全无溶剂的快速蒸馏香精油的新技术。　因此，微波辅助水蒸汽蒸馏是一种真正意义上的快速、　究［Ｊ］．中国调味品，２００５（８）：２８—３１．　［４］吴春华，张加研，赵黔榕，等．微波辐照合成乙酸松油酯的　研究口］．林产化学与工业，２００７，２７（４）：１２３—１２５．　［５］王艳，张铁军．微波萃取技术在中药有效成分提取中的应　用［Ｊ］．中草药，２００５，３６（３）：４７０—４７３．　［６］张代佳，刘传斌，修志龙，等．微波技术在植物胞内有效成　收率高的环保节约型无溶剂新方法，可用于蒸馏各类　新鲜香料植物的挥发油。　参考文献：　份提取中的应用［Ｊ］．中草药，２０００，３１（９）：５－６．　［７］ＣＡＭＥＬ　Ｖ．Ｍｉｃｒｏｗａｖｅ－ａｓｓｉｓｔｅｄ　ｓｏｌｖｅｎｔ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｅｎｖ－　ｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　ｓａｍｐｌｅｓ［Ｊ］．Ｔｒｅｎｄｓ　ｉｎ　Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，　２０００，１９（４）：２２９—２４８．　Ｅｌｉ陈毓亨．我国姜科山奈属药用植物研究［Ｊ］．药学学报，　１９８４，１９（７）：５２８．　［２］吴润，吴峻松，方洪钜，等．山奈和苦山奈精油化学成分的比　较研究［Ｊ］．中药材，１９９４，１７（１０）：２７－２９．　［８］ＥＳＫＩＬＳＳＯＮ　Ｃ　Ｓ，ＢＪＯＲＫＩＵＮＤ　Ｅ．Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ—ｓｃａｌｅ　ｍｉｃｒｏ－　ｗａｖｅ－ａｓｓｉｓｔｅｄ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　Ａ，２０００，９０２（１）：２２７—２５Ｏ．　［３］凌育赵．水蒸气蒸馏提取沙姜中特性组分——沙姜油的研　（上接第６１页Ｊ　该法将水蒸汽蒸馏和馏出液的溶剂萃取两步合二　为一，提高了萃取效率，并减少了溶剂用量。　同时蒸馏一萃取得到的挥发油不需复杂预处理，免　去了操作污染，节省了萃取时间，得到的提取物气味浓　郁，在国内外的研究中，此种方法已经被广泛应用于香　３．３讨论　试验中没有将粉碎粒度作为因素之一，是因为粉碎后　的茴香根挥发油挥发快，不适合大规模生产的需要，因此将　其作为因素之一没有意义，故只考虑浸泡时间、料液比和提　取时间３个因素。提取时应注意控制温度，烧开后宜用文　火保持沸腾，各次试验尽量同一标准，以免影响结果。　味物质的提取中，其中在提取植物的精油方面也有了　广泛的研究［５］。　参考文献：　由实验结果可知，浸泡时间对提取率影响最大，即　浸泡时间越长提取率越大，但在大规模生产时，要综合　考虑经济成本，可适当的缩短提取时间。　由实验结果可知，水分对提取率几乎没有影响，因　此，只要水分足够，挥发油就能充分被提取出来，考虑　［１］徐善述，杨洪珍．浅谈三种茴香油及工业生产方法［Ｊ］．　天津化工，２００３，１７（４）：３２－３３．　［２］朱兆云．大理中药资源志［Ｍ］．昆明：云南民族出版社，　１９９ｌ：１０２．　到对经济效益的影响，最佳的料液比为１：１０。　提油时，采用同时蒸馏萃取方法。同时蒸馏一萃取　法较传统水蒸汽蒸馏提取具有以下优点：　由于ＳＤＥ法所获得的是挥发油溶于有机溶剂的溶　液，体积较大，便于操作，避免了通常蒸馏法提取精油时　在器壁上吸附损失及转移微量精油时的操作困难。　［３］韦群辉，朱兆云．茴香根的生药学研究［Ｊ］．华西药学　杂志，２０００，１５（５）：３３８—３４０．　［４］彭秧锡．同时蒸馏萃取器及其使用方法［Ｊ］．理化检验一化　学分册，２００４，４０（５）：２９６．　［５］谢功昀，陈发河，吴光斌．同时蒸馏萃取法提取柚皮油的研　究［Ｊ］．香精香料化妆品，２００８（２）：１７—２Ｏ，２５—２７．　一６５—