杨梅提取物缓解小鼠体力疲劳的作用

杨梅提取物缓解小鼠体力疲劳的作用

作者：张颖 徐军 陆罗定 刘协

来源：《江苏农业科学》2016年第12期

摘要：为研究杨梅提取物缓解体力疲劳作用，经口给予健康ICR小鼠0、85、170、510 mg/kg剂量的杨梅提取物 32 d 后，分别进行负重游泳试验、肝糖原测定、血乳酸测定和血清尿素氮测定。结果显示，高剂量组小鼠游泳时间比对照组极显著延长（P 关键词：杨梅提取物；缓解体力疲劳；小鼠 中图分类号： R284.1文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2016）12-0290-02 收稿日期：2016-04-12

作者简介：张颖（1979—），女，江苏句容人，硕士，副主任技师，主要从事卫生毒理学研究。E-mail：694763830@qq.com。

通信作者：刘协，主任医师，主要从事卫生毒理学研究。Tel：（025）83759444；E-mail：865778939@qq.com。

杨梅（Myrica rubra）是中国南方特有水果之一，主产区在浙江、江苏、福建等长江流域以南地区。杨梅果实色泽鲜艳、风味独特、柔软多汁、营养丰富，适合加工果汁和果酒等产品，备受消费者青睐。为促进杨梅产业的发展，人们已逐渐对杨梅进行深度开发。目前已有关于杨梅提取物抗氧化、抗腹泻、抑菌抗菌等方面的研究，但其抗疲劳作用少见报道[1-5]。本研究通过小鼠负重游泳试验，测定血清尿素氮、肝糖原含量和血乳酸变化值，检验杨梅提取物缓解体力疲劳的功效，以期为杨梅保健功能的开发利用提供依据。 1材料与方法 1.1材料

1.1.1试验动物雄性健康ICR小鼠，清洁级，体质量 18.0～22.0 g，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，动物生产许可证号：SCXK（沪）2012-0002号。试验动物环境设施合格证号：SYXK（苏）2012-0037。试验期间全部动物给予清洁级全价鼠颗粒饲料和灭菌水自由食用。

1.1.2受试物杨梅提取物是以杨梅成熟果实为原料，用乙醇溶液提取，经食品工业用吸附树脂纯化、浓缩、干燥后制得，由某研发有限公司提供。

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1.1.3仪器与试剂游泳箱，电子天平，TU1810型分光光度计，SBA-40E型全自动生物传感分析仪（乳酸仪），奥林巴斯AU640全自动生化分析仪，JY92-II 型超声波细胞粉碎机等。尿素氮测定试剂盒（脲酶法），购自北京中生生物工程高技术公司；糖原测定试剂盒，购自南京建成生物工程研究所；其余试剂均为分析纯。 1.2方法[6]

1.2.1剂量及分组游泳试验及各项生化指标（血清尿素氮、肝糖原、血乳酸）测定所用动物均按体质量分成4组，每组12只，设为85、170、510 mg/kg 3个剂量组和溶剂（纯净水）对照组，各组受试液以每日20 mL/kg的量经口灌胃，连续32 d。 1.2.2受试物对动物体质量的影响各组动物于试验前后称量体质量。

1.2.3游泳时间测定末次经口灌胃给予受试物30 min后，置尾根部负荷5%体质量铅皮的小鼠于游泳箱中，水深大于30 cm，水温（25±1.0） ℃，记录小鼠从游泳开始至死亡的时间，作为小鼠游泳时间。

1.2.4血清尿素氮含量的测定末次经口灌胃给予受试物30 min后，在温度为30 ℃的水中游泳90 min，休息60 min后采血，分离血清后按有关试剂盒要求检测。

1.2.5肝糖原含量测定末次给予受试物30 min后处死动物，取肝脏100 mg，置于5%三氯乙酸溶液中匀浆、离心，95%乙醇沉淀糖原，蒽酮法测定肝糖原含量。

1.2.6乳酸含量测定首先眼内眦采血测定安静状态下的血乳酸基础值；末次给予受试物30 min后，在30 ℃水中游泳 10 min，捞起擦干，立即第2次眼内眦采血，休息30 min后第3次眼内眦采血，均用乳酸仪测定乳酸含量。 1.3统计方法

所有测量值均先进行方差齐性检验，满足方差齐的要求，进行单因素方差分析，对P 2结果与分析

2.1杨梅提取物对小鼠体质量的影响

由表1可见，各剂量组小鼠的初始体质量差异不显著（P>0.05），即小鼠的初始体重在各组间较为均衡。经口给予小鼠不同剂量的杨梅提取物32 d后，各组终末体质量满足方差齐的要求，差异不显著（P>0.05），即杨梅提取物对小鼠的体质量增长无明显影响。 2.2杨梅提取物对小鼠负重游泳时间、肝糖原含量、血清尿素氮含量的影响

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高剂量组小鼠平均游泳时间高于对照组小鼠平均游泳时间，差异极显著（P0.05），提示杨梅提取物可以延长小鼠的负重游泳时间；低、中和高剂量组小鼠肝糖原含量均高于对照组小鼠肝糖原含量，而且高剂量组值与对照组值比较差异极显著（P0.05）（表2）。说明杨梅提取物能增加负重游泳时间、增加肝糖原含量和减少疲劳小鼠血清尿素氮产生。 2.3杨梅提取物对小鼠血乳酸含量的影响

由表3可知，中、高剂量组小鼠运动前后血乳酸变化值均低于对照组小鼠运动前后血乳酸变化值，差异极显著（P 3结论与讨论

负重游泳试验是评价药物抗疲劳作用的动物模型，游泳时间的长短与运动耐力有关，可以反映动物运动疲劳的程度[7]。糖是机体的主要供能物质，肝糖原贮备的提高可维持长时间运动时血糖浓度，有利于机体耐力速度的提高，并减少蛋白质和含氮化合物的分解代谢，延缓疲劳的出现[8]。乳酸和尿素氮都是机体运动代谢的产物。血液中乳酸的变化情况和血清中尿素氮水平能反映机体无氧酵解和含氮化合物的代谢状况，是评价机体运动负荷的指标[9]。 杨梅果实在成熟时呈红色或紫色，这是由一类与黄酮类似结构的物质-花色苷所致[10]。杨梅提取物中也含有大量的花色苷[2，11-12]。花色苷是花青素与糖以糖苷键结合而成的一类化合物，是花青素主要的存在形式，广泛存在于植物的细胞液中，是植物最主要的水溶性色素之一。花色苷作为1种植物中提取的色素拥有多种活性[13-15]。本试验结果表明，杨梅提取物能明显延长小鼠负重游泳时间，加强肝糖原的储备，抑制运动后乳酸的生产和积累，减轻运动时机体利用蛋白质供能的程度，缓解疲劳的发生，降低机体疲劳的程度，与有关报道[16]基本一致，提示杨梅提取物中含有的杨梅花色苷可能为抗疲劳作用的活性成分，其具体的作用机制还有待将杨梅花色苷提纯后进一步研究。 [HS2][HT8.5H]参考文献：[HT8.SS]

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