带绦虫虫种分子分类遗传标记的研究进展

安徽医科大学学报Ａｃｔａ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔａｔｉｓ　Ｍｅｄｉｃｉｎａｌｉｓ　Ａｎｈｕｉ　２０１２　Ｏｃｔ；４７（１０）　・１２４１・　带绦虫虫种分子分类遗传标记的研究进展　刘摘要航综述杨毅梅审校　带绦虫虫种分子分类研究中，遗传标记的选择最为重　要。目前应用的遗传标记有：①线粒体基因：包括线粒体细　胞色素Ｃ氧化酶第１亚基基因（ｃｏｘ１）、细胞色素ｂ基因　（ｍｔＤＮＡ—Ｃｙｔｂ），线粒体一１２Ｓ　ｒＲＮＡ基因（ｍｔＤＮＡ一１２Ｓ　ｒＲＮＡ）。　核生物的起源和线粒体基因的演化提供了便利条　件。线粒体基因组所有这些特征在动物物种分类、　基因进化、现有物种的进化史研究中得到应用。亚　②核基因组中的核糖体基因：包括ＩＴＳ１、ＩＴＳ２基因序列以及　核基因组中的组织蛋白Ｌ型半胱氨酸酶基因序列。现对不　同的遗传标记的种间、种内差异性，以及在带绦虫虫种的分　子分类中的适用范围进行阐述，提出带绦虫虫种鉴定和亚洲　牛带绦虫虫种定位在遗传标记的使用上应该有所区别。　关键词带绦虫；遗传标记；线粒体基因；核糖体基因　中图分类号Ｒ　３８３．３＋２　文献标志码Ａ文章编号１０００—１４９２（２０１２）１０—１２４１—０４　猪带绦虫、牛带绦虫以及亚洲牛带绦虫是引起　人体带绦虫病的主要虫种。带绦虫虫种的鉴别对流　行病学研究和疾病的控制有着重要作用。此外，亚　洲牛带绦虫虫种定位意见并不统一，是新的虫种，还　是牛带绦虫的亚种存在争议，因此寻找牛带绦虫和　亚洲牛带绦虫基因的差异性对亚洲牛带绦虫虫种定　位有着重要意义。不同的遗传标记有着不同的种间　或种内差异性，适用于不同的虫种分类需要，带绦虫　虫种的分子分类工作的目的主要有２个：①未知标　本的虫种鉴定；②绘制完整地系统发育树状图，得　出准确的分子水平差异，以便最终为亚洲牛带绦虫　虫种的定位提供依据。现以带绦虫虫种分子分类的　遗传标记和它们研究的最新进展进行综述。　１线粒体遗传标记　１．１线粒体基因组的特征　动物线粒体基因组很　小，独立于胞核染色体基因组之外，但又与胞核染色　体基因组紧密联系；有相对稳定的基因数目，基本上　是母系遗传，其进化速度相对较慢。ｔＲＮＡ的二级　结构、碱基组成和变异等也有其自身特点，为研究真　２０１２—０１—１８接收　基金项目：国家自然科学基金（编号：３０８６０２５２）　作者单位：大理学院基础医学院寄生虫学教研室，大理６７１０００　作者简介：刘航，男，硕士研究生；　杨毅梅，女，教授，硕士生导师，责任作者，Ｅ—ｍａｉｌ：ｙｉｍｅｉｙｌ０　＠ｇｍａｉｌ．ｃｏｒｎ　洲牛带绦虫和牛带绦虫线粒体基因组全序列核苷酸　的差异性达５．６％，故可根据线粒体基因组序列设　计引物，通过ＰＣＲ法扩增遗传标记片段，可较容易　地鉴别这两个虫种…。　３种带绦虫线粒体基因组已完成测序＿１ｊ，亚洲　牛带绦虫线粒体基因：长度１３　７０３　ｂｐ，ＧＣ含量　２８％，蛋白编码区占２８％，ＧｅｎｅＢａｎｋ登记号　（ＡＦ４４５７９８；ＮＣ－００４８２６）；牛带绦虫线粒体基因组：　长度１３　６７０　ｂｐ，ＧＣ含量２８％，ＧｅｎｅＢａｎｋ登记号　（ＡＦ６８４２７４；ＮＣ－００９９３８）；猪带绦虫线粒体基因组：　长度１３　７０９　ｂｐ，ＧＣ含量２７％，ＧｅｎｅＢａｎｋ登记号　（ＡＢ０８６２５６；ＮＣ－００４０２２）。３种带绦虫线粒体基因　组两个主要非编码区长度的变化，亚洲牛带绦虫：非　编码区１（７０　ｂｐ），非编码区２（１７６　ｂｐ）；牛带绦虫：　非编码区１（６６　ｂｐ），非编码区２（１５９　ｂｐ）；猪带绦　虫：非编码区１（６８　ｂｐ），非编码区２（１９２　ｂｐ）。　１．２线粒体细胞色素Ｃ氧化酶第１亚基基因（ｃｙ－　ｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅｌ，ｅｏｘ１）　亚洲牛带绦虫和牛带绦虫的　整个线粒体基因组长度约为１４　０００　ｂｐ。ｃｏｘｌ基因　为１　６２０　ｂｐ，这两种带绦虫的ｃｏｘｌ部分片段（２６０　ｂｐ，核苷酸序列从９１６～１　１４８　ｂｐ）的序列差异率为　２％～３％Ｅ２］，由其实际的ｃｏｘｌ全部基因序列来计算　两者的基因差异率为４．５％Ｅ３－４］，提示部分基因序　列和完全基因序列所得的结果是不同的。Ｊｅｏｎ　ｅｔ　ａｌ＿４　研究认为，对ｃｏｘｌ基因的部分片段的分析容易　产生偏倚，而对ｃｏｘｌ基因整个序列的分析结果更加　可信。ｃｏｘｌ基因能够区分３种带绦虫，而且能成功　区别猪带绦虫的两种亚型，使分类更加明确　Ｉ６　。　Ｈａｎｃｏｃｋ　ｅｔ　ａｌ　５－６］证实线粒体基因组中的ｅｏｘｌ是区　别不同地域猪带绦虫及其幼虫的“ｍａｒｋｅｒ”基因，并　提出该基因应用于猪带绦虫病和囊尾蚴病的鉴别诊　断。　在ＧｅｎＢａｎｋ中有３种带绦虫的ｃｏｘｌ序列信息，　亚洲牛带绦虫、牛带绦虫和猪带绦虫登记号分别为　ＡＢ１０７２３６、ＡＢ１０７２４５和ＡＦ３６０８７１。　Ｊｅｏｎ　ｅｔ　ａｌ　采用ＰＣＲ扩增测序，对亚洲牛带　・１２４２・　安徽医科大学学报Ａｃｔａ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔａｔｉｓ　Ｍｅｄｉｃｉｎａｌｉｓ　Ａｎｈｕｉ　２０１２　Ｏｃｔ；４７（１０）　绦虫与牛带绦虫的线粒体基因进行序列分析，发现　１２Ｓ　ｒＲＮＡ基因片段的扩增产物进行限制性片段长　ｃｏｘｌ基因序列的差异率为４．６％，提示牛带绦虫和　亚洲牛带绦虫的ｃｏｘｌ基因所具有的差异性，完全可　以用于虫种分子分类以及为亚洲牛带绦虫虫种定位　提供部分依据。ｃｏｘｌ基因在带绦虫虫种分类以及　度多态性分析是对绦虫纲、带属、种或亚种进行分类　的一个可靠的方法。　２核糖体ＤＮＡ序列　猪带绦虫病和囊尾蚴病的鉴别诊断中发挥作用，是　应用最广泛的遗传标记。　１．３　细胞色素ｂ基因（ｍｔＤＮＡ・Ｃｙｔｂ）　ｍｔＤＮＡ—　ｒＤＮＡ是转录核糖体ＲＮＡ的基因，是一类中度　重复序列，以串联多拷贝的形式存在于细胞核内染　色体ＤＮＡ中。每个重复单位由非转录间隔区（ｎｏｎ—　ｔｒａｎｓｃｒｉｂｅｄ　ｓｐａｃｅｒ，ＮＴＳ）、内部转录间隔区（ｉｎｔｅｒｎａｌ　Ｃｙｔｂ位于线粒体环状ＤＮＡ链的功能区中，是线粒体　基因组中进化适中的基因，较短的一个片段就能包　含从种下水平到属水平乃至纲水平的系统发育信　息。ｍｔＤＮＡ．Ｃｙｔｂ在同种动物间碱基变异的量很少，　个体差异性小，遗传稳定性强，而不同种动物之间序　列差异却非常大，种内序列差异小于种间差异，但仍　具有遗传差异，因此可以用于种内鉴别。ｍｔＤＮＡ—　Ｃｙｔｂ在细胞内拷贝数多，比线粒体ｒＤＮＡ和非编码　区的基因更易于排序，分析灵敏度高再加上能用一　些通用引物扩增，被认为是解决系统发育问题最可　信的遗传标记之一。Ｊｅｏｎ　ｅｔ　ａｌ　３一　采用ＰＣＲ扩增测　序，对亚洲牛带绦虫与牛带绦虫的线粒体基因进行　序列分析，发现两者ｍｔＤＮＡ．Ｃｙｔｂ序列的差异率为　４．６％，说明有显著的遗传差距，可以用来分类亚洲　牛带绦虫和牛带绦虫。　张晨吴等　对采自云南楚雄、大理、怒江和贵　州从江的带绦虫标本ｍｔＤＮＡ—Ｃｙｔｂ基因部分区段　ＰＣＲ扩增后，进行测序比对并构建系统发育树结果　显示：云南怒江及大理的带绦虫与台湾亚洲牛带绦　虫的遗传距离较近，为亚洲牛带绦虫；云南楚雄与贵　州从江的带绦虫遗传距离较近，应为牛带绦虫。这　表明在带绦虫生物多态性研究中，尤其是牛带绦虫　与亚洲牛带绦虫的分类研究中，ｍｔＤＮＡ．Ｃｙｔｂ序列可　以作为种间、种内分类的良好分子标靶。　１．４线粒体－１２Ｓ　ｒＲＮＡ基因（ｍｔＤＮＡ－１２Ｓ　ｒＲＮＡ）　ｍｔＤＮＡ一１２Ｓ　ｒＲＮＡ的非同源相似性较高，实际上　更多用于近缘种的研究。目前，国内外学者已将　ｍｔＤＮＡ－１２Ｓ　ｒＲＮＡ基因片段应用于蜘蛛、蛙类、壁　虎、麝类动物等的分类鉴定的研究。Ｊｅｏｎ　ｅｔ　ａｌ＿８　用　牛带绦虫的线粒体基因组全序列与猪带绦虫、亚洲　牛带绦虫的线粒体基因组全序列比较发现，牛带绦　虫的ｍｔＤＮＡ一１２ｒＲＮＡ基因序列与亚洲牛带绦虫有　５％的差异率，与猪带绦虫的差异率为１２％。Ｓｏｍｅｒｓ　ｅｔ　ａｌ　通过扩增ｍｔＤＮＡ一１２Ｓ　ｒＲＮＡ基因片段并进行　限制性片段长度多态性分析，成功地对猪带绦虫、牛　带绦虫、亚洲牛带绦虫进行了区分，证实了ｍｔＤＮＡ．　ｔｒａｎｓｃｒｉｂｅｄ　ｓｐａｃｅｒ，ＩＴＳ）和３种核糖体基因编码区　（１８Ｓ、５．８Ｓ、２８Ｓ）组成，其进化方式一致，个体内的　ｒＤＮＡ序列同源性极强，可作为个体基因研究，方便　分析。由于进化方式的一致性，使种内繁殖的中层　群内的变异体恒定，因而单一个体即可代表其种内　繁殖种群，可有效地对种内的亚种进行鉴别，这是　ｒＤＮＡ基因的特征　Ｊ，并且ＩＴＳ区不加入成熟核　糖体，进化速率较快，可以从不太长的序列中获得较　多遗传信息，更为重要的一点是该基因家族通过不　等交换和基因转变可经历快速的协同进化，不同　ＩＴＳ拷贝间的序列相近或完全＿致，使重复单位在　基因组中具有一致性，所以ＩＴＳ的序列信息可以提　供比较丰富的变异位点和信息位点，容易进行ＰＣＲ　直接测序。其次，由于１８Ｓ、５．８Ｓ和２８Ｓ的高度保守　性，能较方便地设计出上下游引物，而使ＰＣＲ扩增　成为可能，对研究带绦虫虫种种系关系十分有用。　ＩＴＳ序列是ｒＤＮＡ中介于１８Ｓ　ｒＤＮＡ和２８Ｓ　ｒＤＮＡ之　间的内转录间隔区，包含位于１８Ｓ　ｒＤＮＡ和５．８ｓ　ｒＤ．　ＮＡ之间的核糖体ＤＮＡ第一内转录间隔区（ＩＳＴＩ），　以及位于５．８　Ｓ　ｒＤＮＡ和２８Ｓ　ｒＤＮＡ之间的核糖体　ＤＮＡ第二内转录间隔区（ＩＴＳ２）两段序列，有时也将　ＩＴＳ１、５．８Ｓ　ｒＲＮＡ和ＩＴＳ２统称为ＩＴＳ区。由于ＩＴＳ　区受外界环境因素的影响较小，进化速度较快，因而　具有种间变异大的特性，如猪带绦虫和牛带绦虫　ＩＴＳ区变异大，可以用于种间分类，在带绦虫虫种分　类及亚洲牛带绦虫虫种定位研究中，ＩＳＴ序列是很　好的遗传标记　。　张朝云等　对贵州都匀株、从江株、云南大理　株以及台湾桃园株带绦虫ｒＤＮＡ．ＩＴＳ１区段进行ＰＣＲ　扩增、测序、构建系统发育树，结果表明在带绦虫分　类研究中，ｒＤＮＡ—ＩＴＳ１序列可以作为种内分类的遗传　标记。张科等¨　对我国４省区５地带绦虫ｒＤＮＡ—　ＩＴＳ２序列进行测定分析，结果显示：从ｒＤＮＡ．ＩＴＳ２　序列的角度确定了贵州都匀株、云南大理株为亚洲　牛带绦虫，贵州从江株、新疆乌什株为传统牛带绦　安徽医科大学学报Ａｃｔａ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔａｔｉｓ　Ｍｅｄｉｃｉｎａｌｉｓ　Ａｎｈｕｉ　２０１２　Ｏｃｔ；４７（１０）　・１２４３・　虫。李晓娟等　对采自云南香格里拉的带绦虫标　本的ｒＤＮＡ—ＩＴＳ１区段进行ＰＣＲ扩增测序，证实云南　片段，即使偶尔选择两个遗传标记，也是每个遗传标　记单独分析，这并不合理。从虫种鉴定角度看，单一　香格里拉带绦虫存在亚洲牛带绦虫。李强等¨　对　云南洱海环湖区域的带绦虫ｒＤＮＡ－ＩＴＳ２序列进行测　序分析，结果证实洱源与挖色（大理地区）存在牛带　绦虫，双廊、周城和喜洲（大理地区）存在亚洲牛带　绦虫，研究证明ＩＴＳ２序列在研究带绦虫近缘种的系　统进化关系以及亚洲牛带绦虫和牛带绦虫分子分类　遗传标记的应用是可行的，单一遗传标记只要存在　种间或种内差异性就可以用于鉴别虫种。但单一遗　传标记用于亚洲牛带绦虫的虫种定位研究，会使虫　种定位结果产生误差，原因是分子分类并不是适合　任何基因，使用的基因用于种间分类则必须最大限　度容纳种间差异性，排除种内差异性和个体差异性；　方面具有很高的应用价值。　３核基因组织蛋白　型半胱氨酸酶基因（ｃｌｐ）　ｃｌｐ是核基因组成员，猪带绦虫为３　１５９　ｂｐ，牛　带绦虫和亚洲牛带绦虫为３　１６６　ｂｐ，通过ｂｌａｓｔ同源　性对比，猪带和牛带绦虫同源性为９２％，差异性较　大；牛带绦虫和亚洲牛带绦虫同源性为９８％，差异　性较小，因此ｃｌｐ基因寻找牛带绦虫和猪带绦虫的　差异性较为容易，而寻找牛带绦虫和亚洲牛带绦虫　差异性较困难。Ｎｋｏｕａｗａ　ｅｔ　ａｌｌ１８］首次用ＬＡＭＰ（环　介导等温扩增技术）扩增ｃｌｐ基因片段，鉴别带绦虫　虫种，反应后电泳显示，只能区分牛带绦虫和猪带绦　虫，但不能区分牛带绦虫和亚洲牛带绦虫，牛带绦虫　和亚洲牛带绦虫要通过限制性内切酶酶切后区分。　荧光定量ＰＣＲ技术融合了ＰＣＲ的高灵敏性，ＤＮＡ　杂交技术的高特异性和光谱技术的高定量性的优　点　，而ＬＡＭＰ技术是一种操作更简便，灵敏性、特　异性、定量性和荧光ＰＣＲ相近或超出的新型技术，　虽然现阶段ＬＡＭＰ技术未成功利用ｃｌｐ基因区分虫　种，但这与引物的设计可能有很大关系，选择差异性　较大序列，重新设计引物，可能会得出不同结果。　４遗传标记的对比分析及适用范围　带绦虫线粒体基因与核基因组中的核糖体基因　以及组织蛋白￡型半胱氨酸酶基因相比较，线粒体　基因（尤其是ｃｏｘｌ基因）差异性最大，最适合带绦虫　分子分类；其次，核糖体基因也是较好的遗传标记，　但其存在于核基因，一个细胞一般只有一组核基因，　却有多个线粒体，即多组线粒体基因组，在标本量较　小情况下，线粒体基因组更适合分子分类；组织蛋白　型半胱氨酸酶基因序列差异性小，分类效果较差，　但可以作为其他基因分子分类的补充。目前遗传标　记的应用在带绦虫虫种鉴定和亚洲牛带绦虫的虫种　定位上存在混淆，无论是虫种鉴定还是亚洲牛带绦　虫虫种定位往往都是选择一个或两个遗传标记，甚　至ＰＣＲ扩增的产物经常只是某一遗传标记的部分　基因用于种内分类则最大的容纳种内差异性，排除　个体差异性，这些是遗传标记的特有特征，所以分子　分类必须使用遗传标记，遗传标记具有种或亚种所　特有的遗传特征，但遗传标记只是很短的一小段基　因，它并不能代表整个基因组的差异性，只有多遗传　标记才可近似的代表整个基因组的差异性。亚洲牛　带绦虫的虫种定位工作实际上是在排除亚洲牛带绦　虫和牛带绦虫的个体差异性的基础上寻找两者之间　整个基因组的种间差异性或种内差异性。遗传标记　的完整片段、部分片段、同一基因的不同片段以及多　遗传标记的差异性分析，可以产生完全不同的结果，　所以在亚洲牛带绦虫虫种定位研究中，选择多遗传　标记和遗传标记的全序列分析，绘制更加完整地，可　以代表整个基因组的系统发育树，应该更为合理。　参考文献　［１］贾万忠，闫鸿斌，郭爱疆，等．带科绦虫线粒体基因组全序列研　究进展［Ｊ］．中国人兽共患病学报，２０１０，２６（６）：５９６—６００．　［２］　陈峥宏，郎书源，包怀恩．用ｃｏｘｌ基因片段的ＰＣＲ鉴别亚洲牛　带绦虫和牛带绦虫［Ｊ］．贵阳医学院学报，２００９，３４（３）：２３９—　４１．　［３］　Ｊｅｏｎ　Ｈ　Ｋ，Ｅｏｍ　Ｋ　Ｓ．Ｔａｅｎｉａ　ａｓｉａｔｉｃａ　ａｎｄ　Ｔａｅｎｉａ　ｓａｇｉｎａｔａ：ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｖｅｒｇｅｎｃｅ　ｅｓｔｉｍａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅｉｒ　ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ　ｇｅｎｏｍｅｓ［Ｊ］．Ｅｘｐ　Ｐａｒａｓｉｔｏｌ，２００６，１１３（１）：５８—６１．　［４］Ｊｅｏｎ　Ｈ　Ｋ，Ｌｅｅ　Ｋ　Ｈ，Ｋｉｍ　Ｋ　Ｈ，ｅｔ　ａ１．Ｃｏｍｐｌｅｔｅ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ａｎｄ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｆｉａｌ　ｇｅｎｏｍｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｈｕｍａｎ　ｔａｐｅｗｏｒｍ，　Ｔａｅｎｉａ　ａｓｉａｔｉｃａ（Ｐｌａｔｙｈｅｌｍｉｎｔｈｅｓ；Ｃｅｓｔｏｄａ）［Ｊ］．Ｐａｒａｓｉｔｏｌｏｇｙ，　２００５，１３０（６）：７１７—２６．　［５］Ｈａｎｃｏｃｋ　Ｋ，Ｂｒｏｕｇｈｅｌ　Ｄ　Ｅ，Ｍｏｕｒａ　Ｉ　Ｎ，ｅｔ　ａ１．Ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ｖａｒｉａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ　ｏｘｉｄａｓｅ　Ｉ，ｉｎｔｅｒｎａｌ　ｔｒａｎｓｃｒｉｂｅｄ　ｓｐａｃｅｒ　１，ａｎｄ　Ｔｓｌ４　ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ　ａｎｔｉｇｅｎ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ｏｆ　Ｔａｅｎｉａ　ｓｏｌｉｕｍ　ｉｓｏｌａｔｅｓ　ｆｒｏｍ　Ｓｏｕｔｈ　ａｎｄ　Ｃｅｎｔｒａｌ　Ａｍｅｒｉｃａ，Ｉｎｄｉａ，ａｎｄ　Ａｓｉａ［Ｊ］．Ｉｎｔ　Ｊ　Ｐａｒａｓｉｔｏｌ，　２００１，３１（１４）：１６０１—７．　［６］　Ｎａｋａｏ　Ｍ，Ｓａｋｏ　Ｙ，Ｙｏｋｏｙａｍａ　Ｎ，ｅｔ　ａ１．Ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉｌａ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｃｏｄｅ　ｉｎ　ｃｅｓｔｏｄｅｓ［Ｊ］．Ｍｏｌ　Ｂｉｏｃｈｅｍ　Ｐａｒａｓｉｔｏｌ，２０００，１１１（２）：　４１５—２４．　［７］　张晨吴，杨毅梅．云南两部三地带绦虫生物多态性分子遗传学　标记的研究［Ｊ］．中国病原生物学杂志，２００９，４（４）：２８３—６．　［８］Ｊｅａｎ　Ｈ　Ｋ，Ｋｉｍ　Ｋ　Ｈ，Ｅｏｍ　Ｋ　Ｓ．Ｃｏｍｐｌｅｔｅ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍｉｔｏ—　ｃｈｏｎｄｆｉａｌ　ｇｅｎｏｍｅ　ｏｆ　Ｔａｅｎｉａ　ｓａｇｉｎａｔａ：ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｗｉｔｈ　Ｔ．ｓｏｌｉｕｍ　・１２４４・　安徽医科大学学报Ａｅｔａ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔａｔｉｓ　Ｍｅｄｉｃｉｎａｌｉｓ　Ａｎｈｕｉ　２０１２　Ｏｃｔ；４７（１０）　◇技术与方法◇　异基因造血干细胞移植治疗骨髓增生异常综合征临床疗效分析　皖湘，孙自敏，刘会兰，耿良权，王兴兵，丁凯阳，童娟，汤宝林，王祖贻　摘要　回顾性分析异基因造血干细胞移植（Ａｌｌｏ—ＨＳＣＴ）治疗　骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）的适应证、治疗时机、移植物的　选择、移植预处理方案的选择和移植疗效。２２例患者中２１　骨髓增生异常综合征（ｍｙｅｌｏｄｙｓｐｌａｓｔｉｃ　ｓｙｎ—　ｄｒｏｍｅ，ＭＤＳ）是一组源于造血干细胞的恶性克隆性　疾病，具有异质性，并以外周血细胞数目减少、１系　或多系的血细胞形态学异常、骨髓造血功能衰竭、向　急性髓细胞性白血病（ａｃｕｔｅ　ｍｙｅｌｏｉｄ　ｌｅｕｋｅｍｉａ，　ＡＭＬ）转化为特点。近年来，异基因造血干细胞移　例获得造血重建，１例非血缘脐血移植（ＵＣＢＴ）未获得植入　的成人患者，于非血缘脐血移植（ＵＣＢＴ）后３８　ｄ进行母亲　ＨＬＡ４／６相合的外周血联合骨髓造血干细胞移植解救治疗　获得植入。２２例中死亡３例，无１例复发。ＭＤＳ患者何时　进行Ａｌｌｏ—ＨＳＣＴ需依据国际预后积分系统（ＩＰＳＳ）对患者分　组，评分属于高危组的患者宜在疾病确诊后尽早进行移植，　而低危组的患者可在其他药物治疗效果不佳的时候进行；不　仅可选择血缘关系的骨髓移植（ＢＭＴ）和外周血造血干细胞　移植（ＰＢＳＣＴ），也可进行非血缘人类白细胞共同抗原（ＨＬＡ）　不全相合的ＵＣＢＴ；移植预处理如采用减低强度的方案　（ＲＩＣ）并不影响移植效果。　关键词　造血干细胞移植；异基因；骨髓增生异常综合征　中图分类号Ｒ　５５１．３　文献标志码Ａ文章编号１０００—１４９２（２０１２）ｌＯ一１２４４—０３　植（Ａｌｌｏ－ＨＳＣＴ）治疗ＭＤＳ取得了很好地疗效，但并　不是所有的ＭＤＳ患者均适合进行移植，移植时机及　移植物来源的选择和移植前预处理方案的选择均可　能影响患者的治疗效果。本院自２００２年１１月以来　进行Ａｌｌｏ－ＨＳＣＴ治疗ＭＤＳ共２２例，现报道如下。　１材料与方法　１．１病例资料收集２００２年１１月～２０１１年１１月　在我院接受Ａｌｌｏ　ＨＳＣＴ的ＭＤＳ患者２２例，女９例，　男１３例，年龄１０～４７岁，中位年龄２０岁。按２００８　年ＷＨＯ分类，诊断为难治性血细胞减少伴多系病　态造血（ＭＤＳ—ＲＣＭＤ）１２例，难治性贫血伴原始细胞　增多（ＭＤＳ—ＲＡＥＢ）５例，ＭＤＳ转ＡＭＬ　５例；白诊断　至进行移植的时间为０～８４个月，中位时间６个月；　２３０００１　２０１２—０４—２５接收　基金项目：安徽省１１５产业创新团队项目；安徽省卫生厅医学科研重　点项目（编号：２０１０Ａ００５）；安徽省十二五科技攻关（编号：　１　１０１０４０２１６４）　作者单位：安徽医科大学附属省立医院血液科，合肥作者简介：皖湘，女，硕士研究生；　按国际预后积分系统（ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ　ｓｃｏｒｉｎｇ　ｓｙｓｔｅｍ，ＩＰＳＳ）分组，ＩＮＴ－１组１３例，ＩＮＴ．２组５例，　孙自敏，女，教授，主任医师，硕士生导师，责任作者，Ｅ．　ｍａｉｌ：ｚｍｓｕｎ２００３＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｎ．ｅｎ　Ｈｉｇｈ组４例；移植物来源：非血缘脐血移植（ＵＣＢＴ）　ａｎｄ　Ｔ．ａｓｉａｔｉｃａ［Ｊ］．Ｐａｒａｓｉｔｏｌ　Ｉｎｔ，２００７，５６（３）：２４３—６．　［９］Ｓｏｍｅｒｓ　Ｒ，Ｄｏｍｙ　Ｐ，Ｇｅｙｓｅｎ　Ｄ，ｅｔ　ａ１．Ｈｕｍａｎ　ｔａｐｅｗｏｒｍｓ　ｉｎ　ｎｏｒｔｈ　２００１，３（４）：３５５—６１．　［１４］张朝云，杨５．　明，张科，等．云贵两省三地牛带绦虫核糖体　Ｖｉｅｔｎａｍ［Ｊ］．Ｔｒａｎｓ　Ｒ　Ｓｏｃ　Ｔｒｏｐ　Ｍｅｄ　Ｈｙｇ，２００７，ｔＯ１（３）：２７５—　７．　ｒＤＮＡ．ＩＴＳ１序列分析［Ｊ］．贵阳医学院学报，２００６，３１（４）：２９１　—［１Ｏ］Ｌｏｏｓ—Ｆｒａｎｋ　Ｂ．Ａｎ　ｕｐ－ｄａｔｅ　ｏｆ　Ｖｅｒｓｔｅｒ’Ｓ（１９６９）’Ｔａｘｏｎｏｍｉｃ　ｒｅｖｉ—　ｓ／ｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｇｅｎｕｓ　Ｔａｅｎｉａ　Ｌｉｎｎｅａｕｓ’（Ｃｅｓｔｏｄａ）ｉｎ　ｔａｂｌｅ　ｆｏｒｍａｔ［Ｊ］．　Ｓｙｓｔ　Ｐａｒａｓｉｔｏｌ，２０００，４５（３）：１５５—８３．　［１５］张科，杨明，包怀恩．我国４省区５地牛带绦虫ｒＤＮＡ—ＩＴＳ２　序列分析［Ｊ］．中国人兽共患病学报，２００６，２２（１０）：９１８—１．　［１６］李晓娟，杨毅梅．云南香格里拉的带绦虫ｒＤＮＡ—ＩＴＳ１序列测定　［１　１］Ｐｏｗｅｌｌ　Ｗ，Ｍｏｏｒｇａｎｔｅ　Ｍ，ＭｃＤｅｖｉｔｔ　Ｒ，ｅｔ　ａ１．Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ　ｓｉｍｐｌｅ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ｒｅｐｅａｔ　ｒｅｇｉｏｎ　ｉｎ　ｃｈｌｏｒｏｐｌａｓｔ　ｇｅｎｏｍｅ：ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ　ｔｏ　ｔｈｅ　及分析［Ｊ］．中国人兽共患病学报，２００８，２４（１０）：９２３—５．　［１７］李强，杨毅梅．云南洱海环湖带绦虫ｒＤＮＡ—ＩＴＳ２序列测定及　分析［Ｊ］．第四军医大学学报，２００９，３０（４）：２９５—７．　［１８］Ｎｋｏｕａｗａ　Ａ，Ｓａｋｏ　Ｙ，Ｎａｋａｏ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｌｏｏｐ—ｍｅｄｉａｔｅｄ　ｉｓｏｔｈｅｒｍａｌ　ａｍｐｌｉｉｆｃａｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｒａｐｉｄ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｔａｅ－　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ　ｇｅｎｅｔｉｃｓ　ｏｆ　ｐｉｎｅｓ［Ｊ］．Ｐｒｏｃ　Ｎａｔｌ　Ａｃａｄ　Ｓｃｉ　ＵＳＡ，１９９５，　９２（１７）：７７５９—６３．　［１２］余道坚，康栋，陈志　，等．昆虫分子标记基因和序列及应用　［Ｊ］．检验检疫，２００３，３（１７）：１５６—９．　［１３］Ｃｈｕ　Ｋ　Ｈ，Ｌｉ　Ｃ　Ｐ，Ｈｏ　Ｈ　Ｙ．Ｔｈｅ　ｆｉｒｓｔ　ｉｎｔｅｒｎａｌ　ｔｒａｎｓｃｒｉｂｅｄ　ｓｐａｃｅｒ　（ＩＴＳ一１）ｏｆ　ｒｉｂｏｓｏｍａｌ　ＤＮＡ　ａｓ　ａ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｍａｒｋｅｒ　ｆｏｒ　ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ　ｎｉａ　ｓｐｅｃｉｅｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２００９，４７（１）：１６８—７４．　［１９］金艳，王明丽，赵俊，等．荧光定量ＰＣＲ法和巢式ＰＣＲ法　检测新生儿脐血人巨细胞病毒ＤＮＡ的比较［Ｊ］．安徽医科大学　学报，２０１１，４６（２）：１９３—６．　ａｎｄ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ　ａｎａｌｙｓｅｓ　ｉｎ　ｃｒｕｓｔａｃｅａ［Ｊ］．Ｍａｒ　Ｂｉｏｔｅｅｈｎｏｌ（ＮＹ），