2020NO.1China&ForeignMedicalTreatment中外医疗DOI院10.16662/j.cnki.1674-0742.2020.01.171新生儿ABO溶血病实验诊断的方法学与价值分析陈继良袁章驰江苏省泗洪县妇产儿童医院袁检验科223900[摘要]目的探讨在新生儿ABO溶血病诊断方法袁筛选出诊断最为准确的诊断方法袁并探讨早期诊断早期干预的价值遥方法回顾性分析2017年7月要2019年3月时间内袁方便收集的临床疑似ABO溶血病的新生儿案例232例袁对所有患者进行微柱凝胶法诊断袁分析微柱凝胶法溶血3项实验的结果遥结果微柱凝胶法的溶血3项实验结果为1例渊0.43%冤直接抗人球蛋白试验阳性袁1例渊0.43%冤间接抗人球蛋白试验阳性袁67例渊28.88%冤热放散试验阳性袁1例渊5.60%冤直抗阳性+间抗阳性+热放散阳性袁74例渊31.90%冤全部阴性遥结论在新生儿ABO溶血病诊断中使用微柱凝[关键词]新生儿ABO溶血病曰微柱凝胶法曰溶血3项实验曰诊断[中图分类号]R722[文献标识码]A[文章编号]1674-074圆渊圆园20冤01渊a冤原园171-03渊0.43%冤直抗阳性+间抗阳性袁2例渊0.86%冤直抗阳性+热放散阳性袁73例渊31.47%冤间抗阳性+热放散阳性袁13例胶法方法袁符合率较高袁并且简单尧灵敏袁特异性也较高袁对新生儿ABO溶血病的诊断具有较大的临床价值遥MethodologyandValueAnalysisofExperimentalDiagnosisofNeonatalABOHemolyticDiseaseCHENJi-liang,ZHANGChiDepartmentofClinicalLaboratory,MaternalandChildHealthHospital,Sihong,JiangsuProvince,223900China[Abstract]ObjectiveToinvestigatethediagnosticmethodforneonatalABOhemolyticdisease,toscreenoutthemostac鄄curatediagnosticmethod,andtoexplorethevalueofearlydiagnosisofearlyintervention.MethodsAretrospectiveanalysisof232casesofclinicallysuspectedABOhemolyticdiseaseintheperiodfromJuly2017toMarch2019,micro-columngeldiagnosisofallpatients,convenientanalysisofmicrocolumngelmethodhemolysisthreeresultsoftheexperiment.ResultsTheresultsofthreeexperimentsofhemolysisinmicrocolumngelmethodwere1case(0.43%)positivefordirectanti-hu鄄leasetest,1case(0.43%)directanti-positive+inter-anti-positive,2cases(0.86%)directanti-positive+heat-releasingheat-releasingpositive,74cases(31.90%)wereallnegative.ConclusionThemicrocolumngelmethodisusedinthediag鄄valueforthediagnosisofneonatalABOhemolyticdisease.manglobulintest,1case(0.43%)positiveforindirectanti-humanglobulintest,and67cases(28.88%)forpositiveheatre鄄positive,73cases(31.47%)anti-positive+heat-releasingpositive,13cases(5.60%)directanti-positive+anti-positive+nosisofneonatalABOhemolyticdisease.Thecoincidencerateishigh,simple,sensitiveandspecific.Ithasgreatclinical[Keywords]NeonatalABOhemolyticdisease;Microcolumngelmethod;Threeexperimentsofhemolysis;Diagnosis临床上对于溶血症主要分为ABO溶血症和RH溶血症袁RH溶血率在我国较低袁因为RH阳性占人口的母亲为RH阴性而父亲为RH阳性时袁胎儿将继承父亲的RH阳性遥RH抗原可以在分娩时进入母亲的血液循环袁刺激其抗体的产生遥在第2次怀孕时袁如果胎儿是RH阳性袁母体的RH抗体会迅速增加袁可以通过胎盘进入胎儿血液循环袁导致胎儿溶血袁其中袁RH溶血症状[作者简介]陈继良渊1984-冤袁男袁江苏宿迁人袁本科袁主管检验师袁研究方向院临床医学检验技术遥胎儿的发病率较高遥新生儿的ABO溶血病渊ABOhemolyticdiseaseofthenewborn,ABOHDN冤是指出生的新生儿的血型与母亲血型不符合袁而导致的溶血现象[1]遥大多数母亲为O型袁新生儿为A型或者B型袁主要原因是当胎儿从父亲处取得的血型抗原与母亲不同时袁进入母亲体内会刺激母亲产生相应的抗体遥它可以通过胎盘进入胎儿体内袁抗原抗体与胎儿体内红细胞发生反应袁引起溶血遥该研究方便选取2017年7月要对象袁筛选出诊断最为准确的诊断方法袁并探讨早期诊China&ForeignMedicalTreatment中外医疗99%袁RH阴性不到1%遥RH溶血通常发生在第2胎遥当2019年3月232例疑似新生儿ABO溶血病作为研究171中外医疗2020NO.1China&ForeignMedicalTreatment断早期干预的价值遥1资料与方法1.1一般资料回顾性分析方便收集的临床疑似ABO溶血病的新生儿案例232例袁其中有118例男性新生儿袁114例女性新生儿袁年龄范围院3d以内133例袁4~7d76例袁7d以上23例袁早产儿68例袁足月产儿141例袁过期产儿并经过伦理委员会批准袁纳入标准院所有患者均初步诊断为ABO溶血病袁临床主要表现为贫血尧黄疸尧肝脾肿大尧高胆红素血症等曰排除标准院感染袁凝血障碍袁葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏袁其他新生儿并发症袁血液疾病[2]性+热放散阳性袁73例渊31.47%冤游离抗阳性+热放散阳性袁13例渊5.60%冤直抗阳性+游离抗阳性+热放散阳性袁3讨论74例渊31.90%冤全部阴性遥见表1遥新生儿ABO溶血症渊ABOhemolyticdiseaseofthenewborn,ABOHDN冤临床较为常见袁主要就是因为母婴血型不合袁导致的同族免疫性溶血袁溶血又是指红细胞膜破裂袁红细胞发生溶解的现象[6]遥主要原因是当胎儿从父亲处取得的血型抗原与母亲不同时袁进入母亲体内后会刺激母亲产生相应的抗体遥它可以通过胎盘进入胎儿体内袁抗原抗体与胎儿红血球发生反应袁引起溶于A型和B型的数量院A抗原比B抗原强袁所以母亲型血[7]遥在ABO系统中袁因为具有抗A或O型人的数量高23例遥该次研究所有新生儿直系亲属全部签署同意书袁1.2检查方法血液不放入抗凝剂袁采集后直接离心袁上层为血清袁下层为红细胞袁用生理盐水充分洗涤患儿红细胞4次袁保留最后一次洗涤液袁向洗涤后的红细胞内加入等量的生理盐水或6%牛血清白蛋白袁在56益水浴中振荡混匀10min袁在预温的离心管中离心后袁立即转移放散液到洁净的试管中遥微柱凝胶法[4]院用微柱凝胶卡标记直抗袁游离尧放红细胞悬液袁血清和放散液的制备[3]院将新生儿的遥生袁母体已经受到类似自然界中A和B物质的抗原的刺激袁并与抗A或抗B抗体有关联遥RH溶血的免疫抗和胎儿型更容易生病[8]遥ABO溶血大多在第1胎上发体只能由人的血细胞作为抗原刺激而产生遥胎儿红细胞在分娩时进入母亲体内时袁除了有输血史外袁第1胎出现溶血是罕见的[9]遥我国大部分人的RH血型为阳性袁有黄疸出现并迅速增加的症状遥并且随着黄疸的加深袁可出现贫血尧肝脾肿大袁严重时会出现胆红素脑病遥也可导致心脏衰竭尧全身水肿袁甚至死亡[10]遥严重危害新生儿的健康和生命袁因此对于ABO的溶血及时诊断是十分必要的袁只有早诊断早干预才会保障新生儿的健康和生命遥溶血3项试验是指的直接抗球蛋白试验尧游离抗体试验尧放散试验袁直接抗球蛋白试验主要是检测新生儿的红细胞是否被来自母体的IgG抗A或抗B所致敏袁游离抗体试验是检测血清袁如果新生儿血清中发现与其红细胞不配合的IgG抗A(B)时袁表明婴儿体内有抗体袁可能受害遥该次研究袁微柱凝胶法的溶血3项实验结果为1例渊0.43%冤直接抗人球蛋白试验阳性袁1例渊0.43%冤间接抗人球蛋白试验阳性袁67例渊28.88%冤热放散试验阳性袁性+热放散阳性袁73例渊31.47%冤间抗阳性+热放散阳性袁渊31.90%冤全部阴性遥覃日吉等[11]依据其所选择的ABO13例渊5.60%冤直抗阳性+间抗阳性+热放散阳性袁74例1例渊0.43%冤直抗阳性+间抗阳性袁2例渊0.86%冤直抗阳因此RH溶血在我国是罕见的遥ABO溶血的新生儿会散袁在微柱的凝胶孔中加入新生儿的红细胞悬液袁血清和放散液袁并在血清和放散液的孔中加入同型对照袁用最后一次洗涤液做平行对照袁孵育15min后袁用卡式离心机进行离心袁分析结果遥红细胞聚集在凝胶卡上或中部者为阳性袁红细胞沉积凝胶卡底部者为阴性遥1.3观察指标分析微柱凝胶法溶血3项实验结果遥对3项试验同时阳性者可确诊新生儿溶血病曰未同时出现阳性者以抗体释放试验阳性为诊断标准曰直接抗人球蛋白试验和渊或冤游离抗体试验阳性而抗体释放试验阴性者为可疑袁结合临床表现综合分析[5]遥2结果2.1溶血3项试验结果微柱凝胶法的溶血3项实验结果为1例渊0.43%冤直接抗人球蛋白试验阳性袁1例渊0.43%冤游离抗人球蛋白试验阳性袁67例渊28.88%冤热放散试验阳性袁1例渊0.43%冤直抗阳性+游离抗阳性袁2例渊0.86%冤直抗阳表1直接抗人球蛋白试验阳性1渊0.43冤游离抗人球蛋白试验阳性1渊0.43冤热放散试验阳性67渊28.88冤血型不合致HDN的患儿袁应用微柱凝胶卡法实施检微柱凝胶法的溶血3项实验结状况[n(%)]直抗阳性+游离抗直抗阳性+热放散游离抗阳性+热放直抗阳性+游离抗阳性1渊0.43冤阳性2渊0.86冤散阳性73渊31.47冤阳性+热放散阳性13渊5.60冤阴性74渊31.90冤172中外医疗China&ForeignMedicalTreatment2020NO.1China&ForeignMedicalTreatment中外医疗查袁确诊率为98.9豫袁显著高于试管法86.9%遥另外袁微柱凝胶卡组抗体释放试验尧游离抗体试验尧抗球蛋白试验阳性率依次为100.0%袁96.7%袁97.8豫袁高于试管组该次研究结果一致遥77.2%袁75.0%袁68.5%袁差异有统计学意义渊P约0.05冤遥与微柱凝胶法是用微柱凝胶卡标记直抗袁游离尧放散袁在微柱的凝胶孔中加入新生儿的红细胞悬液袁血清和放散液袁并在血清和放散液的孔中加入同型对照袁当红细胞聚集在凝胶卡上或中部者为阳性袁红细胞沉积凝胶卡底部者为阴性遥该方法血清尧红细胞悬液以及[12][2]梁虹.早期检测血清胱抑素C在新生儿ABO溶血病高胆2017,32(10):2144-2145.红素血症肾功能损害中的诊断价值[J].中国妇幼保健,[3]杨苗芬.ABO溶血病早期诊断中无创胎儿血型产前诊断的意义[J].中国妇幼健康研究,2017,28(S1):531-532.[4]KumawatV,KulkarniK,GoyalM,etal.ABOHemolyticDiseaseofFetusandNewborn;StillaDiagnosticDilemma:TransfusionAnOfficialJournalofIndianSocietyofHema鄄tology&BloodTransfusion,2018,34(1):183.ACaseReport[J].IndianJournalofHematology&Blood放散液的用量较小袁检测结果较为准确遥并且通过调节凝胶的浓度袁使得阴阳性的区分更为明显袁诊断更为准[5]陈洁,詹瑛,于莎.脐带血溶血检查在早期诊断新生儿溶血病中的价值[J].中国妇幼保健,2017,32(4):757-758.[6]梁虹.早期检测血清胱抑素C在新生儿ABO溶血病高胆32(10):2144-2145.确遥微柱凝胶法则是最新的免疫学测量技术袁微柱凝胶法中使用的微柱含有大分子溶液袁无红细胞清洗袁即可进行抗人球蛋白试验袁检测灵敏度得到大大的提高袁也可用于其他检测方法难以检测的弱凝集试样袁使其被准确的检测遥此外袁微柱凝胶法对于操作者的技术和验证要求较低袁易操作袁短时间内即可完成测试袁相关因素所造成的影响程度明显降低袁易于解释袁可作为常规的检测方法遥另外ABO溶血会导致新生儿的心脏衰竭袁甚至是死亡袁因此对于ABO溶血的早期诊断也是十分重要的袁一般对于ABO溶血的早期诊断主要是检测孕妇血清中的IgG亚类袁研究证明新生儿ABO溶血发病随母体IgG抗体效价水平升高而上升袁对于夫妻血型不合的O型血孕妇应提早进行IgG抗体效价水平和IgG亚类含量的检测袁早期的诊断可以降低ABO溶血发病率遥综上所述袁在新生儿ABO溶血病诊断中使用微柱凝胶法方法袁与试管法相比操作更为简单尧灵敏袁特异性也较高袁结果客观袁对新生儿ABO溶血病诊断的诊断具有较大的临床价值遥[参考文献][1]姚超峰.脐带血血清总胆红素检测在新生儿ABO溶血病早期诊治中的临床价值[J].河北医学,2018,24(5):30-34.红素血症肾功能损害中的诊断价值[J].中国妇幼保健,2017,[7]DanaM,FibachE.EliminationofABOBloodGroupIn鄄compatibleFetalRedBloodCellsintheMaternalCircula鄄rhage[J].Neonatology,2018,114(4):303.tion:RelevancetotheDiagnosisofFetal-MaternalHemor鄄[8]姬元忠,张玉春,邢银花.凝聚胺技术与微柱凝胶技术在析[J].内科,2017,12(1):108-110.ABO新生儿溶血病患儿输血前检验中的应用价值对比分[9]ChristensenRD,BaerVL,MacqueenBC,etal.ABOhemolyticdiseaseofthefetusandnewborn:thirteenyearsofdataafterimplementingauniversalbilirubinscreeningandmanagementprogram[J].JournalofPerinatology,2018,38(5):1.[10]孔庆铸,袁春雷,彭建明,等.孕妇血型抗体效价与新生儿97-99.ABO溶血病的相关分析[J].检验医学与临床,2017,14(1):[11]覃日吉,谭玉清,杨莉莉,等.微柱凝胶卡在辅助诊断ABO40(15):94-96.血型不合新生儿溶血病中的应用价值[J].广西医学,2018,[12]陈明,陈小鹤,曾珏,等.母婴ABO血型不合新生儿溶血病97.的临床与实验室研究[J].中华全科医学,2018,16(10):95-渊收稿日期院2019-10-08冤窑编读往来窑基金资助项目或攻关课题论文若系部尧省级以上基金资助项目或攻关课题渊作者应附证书或文件复印件袁并按期编号保存冤袁或者曾在重要国际学术会议上报告袁可在题名页标注脚注渊左下角冤遥曾在国内学术会议上报告的论文一般不必注明遥China&ForeignMedicalTreatment中外医疗173